四逆湯誘導(dǎo)肺腺癌A549細(xì)胞凋亡及對(duì)MAPK信號(hào)通路影響研究.pdf

1、目的:本課題通過(guò)觀察四逆湯對(duì)人肺腺癌細(xì)胞株A549的生長(zhǎng)抑制作用、凋亡情況及對(duì)MAPK信號(hào)通路影響，為完善溫陽(yáng)法抗癌理論提供進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)依據(jù)，為進(jìn)一步提高臨床療效提供科學(xué)理論依據(jù)。對(duì)施展中醫(yī)藥在肺癌治療中的特色與優(yōu)勢(shì)具有積極的意義，指導(dǎo)溫陽(yáng)中藥在臨床防治肺癌中的合理應(yīng)用，同時(shí)為進(jìn)一步的新藥研究提供新的方向，是中西醫(yī)結(jié)合抗肺癌研究的一個(gè)新思路。
　　方法:采用MTT法，觀察四逆湯對(duì)人肺腺癌細(xì)胞A549作用24、48、72小時(shí)后的生長(zhǎng)

2、抑制情況，并用流式細(xì)胞術(shù)(FCM)檢測(cè)細(xì)胞凋亡率，分析不同藥物濃度的四逆湯對(duì)人肺腺癌細(xì)胞A549凋亡的影響。采用Western Blot檢測(cè)ERK，JNK， P38，P-ERK，P-JNK，P-P38，進(jìn)行四逆湯對(duì)MAPK信號(hào)通路影響的研究，檢測(cè)Caspase3，8，9，Bax，Bcl-2活性，進(jìn)行四逆湯誘導(dǎo)肺癌細(xì)胞A549凋亡機(jī)制的初步研究。
　　結(jié)果:(1)四逆湯對(duì)人肺腺癌細(xì)胞A549的生長(zhǎng)起抑制作用，在一定程度上與時(shí)間、劑量

3、呈正相關(guān)，四逆湯作用時(shí)間24、48、72小時(shí)后抑制率也在增高，且四逆湯藥物濃度越高，抑制率也越高。(2)四逆湯能誘導(dǎo)人肺腺癌細(xì)胞A549的凋亡，其凋亡率與藥物濃度在一定程度上呈正相關(guān)，四逆湯藥物濃度越高凋亡率也越高。(3)四逆湯能抑制Erk，能使MAPK通路異常激活被抑制，從而抑制肺腺癌A549細(xì)胞的增殖趨勢(shì);四逆湯能激活bax，抑制bcl-2，具有促進(jìn)凋亡蛋白激酶激活的的效應(yīng)，從而抑制肺腺癌A549細(xì)胞的增殖趨勢(shì)。
　　結(jié)論:四