四逆湯誘導(dǎo)肺腺癌A549細(xì)胞凋亡及對MAPK信號通路影響研究.pdf

1、目的:本課題通過觀察四逆湯對人肺腺癌細(xì)胞株A549的生長抑制作用、凋亡情況及對MAPK信號通路影響，為完善溫陽法抗癌理論提供進(jìn)一步的實驗依據(jù)，為進(jìn)一步提高臨床療效提供科學(xué)理論依據(jù)。對施展中醫(yī)藥在肺癌治療中的特色與優(yōu)勢具有積極的意義，指導(dǎo)溫陽中藥在臨床防治肺癌中的合理應(yīng)用，同時為進(jìn)一步的新藥研究提供新的方向，是中西醫(yī)結(jié)合抗肺癌研究的一個新思路。
　　方法:采用MTT法，觀察四逆湯對人肺腺癌細(xì)胞A549作用24、48、72小時后的生長

2、抑制情況，并用流式細(xì)胞術(shù)(FCM)檢測細(xì)胞凋亡率，分析不同藥物濃度的四逆湯對人肺腺癌細(xì)胞A549凋亡的影響。采用Western Blot檢測ERK，JNK， P38，P-ERK，P-JNK，P-P38，進(jìn)行四逆湯對MAPK信號通路影響的研究，檢測Caspase3，8，9，Bax，Bcl-2活性，進(jìn)行四逆湯誘導(dǎo)肺癌細(xì)胞A549凋亡機制的初步研究。
　　結(jié)果:(1)四逆湯對人肺腺癌細(xì)胞A549的生長起抑制作用，在一定程度上與時間、劑量

3、呈正相關(guān)，四逆湯作用時間24、48、72小時后抑制率也在增高，且四逆湯藥物濃度越高，抑制率也越高。(2)四逆湯能誘導(dǎo)人肺腺癌細(xì)胞A549的凋亡，其凋亡率與藥物濃度在一定程度上呈正相關(guān)，四逆湯藥物濃度越高凋亡率也越高。(3)四逆湯能抑制Erk，能使MAPK通路異常激活被抑制，從而抑制肺腺癌A549細(xì)胞的增殖趨勢;四逆湯能激活bax，抑制bcl-2，具有促進(jìn)凋亡蛋白激酶激活的的效應(yīng)，從而抑制肺腺癌A549細(xì)胞的增殖趨勢。
　　結(jié)論:四