幼年特發(fā)性關(guān)節(jié)炎中Notch信號(hào)通路及相關(guān)基因的表達(dá)與意義.pdf

1、目的：
　　本研究通過(guò)分析Notch信號(hào)通路及相關(guān)基因在幼年特發(fā)性關(guān)節(jié)炎中與淋巴細(xì)胞及細(xì)胞因子水平的關(guān)系，從而探討其在JIA發(fā)病機(jī)制中可能的作用；并進(jìn)一步采用膠原誘導(dǎo)關(guān)節(jié)炎小鼠，明確Notch信號(hào)通路對(duì)幼年特發(fā)性關(guān)節(jié)炎致病機(jī)理的作用，從而為治療幼年特發(fā)性關(guān)節(jié)炎提供新的靶點(diǎn)。
　　方法：
　?。?）JIA組患兒和對(duì)照組患兒外周血中Notch受體、配體及靶基因mRNA的表達(dá)水平用Real time-quantitative

2、 PCR檢測(cè)；血漿中IL-1β、IL-10、IL-6、IL-17、TGF-β及IL-4細(xì)胞因子水平通過(guò)ELISA法測(cè)定；
　?。?）CIA組小鼠及正常對(duì)照組小鼠脾臟中B10和Th17細(xì)胞的頻率用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)；小鼠血漿中IL-10、IL-1β、TGF-β、IL-17A和IL-4水平通過(guò)ELISA法測(cè)定；在B10細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中采用Notch信號(hào)通路阻斷劑DAPT，檢測(cè)阻斷Notch信號(hào)通路后對(duì)B10細(xì)胞增殖的影響以及炎癥因子水平的變

3、化。
　　結(jié)果：
　?。?）與對(duì)照組比較，JIA組外周血中Notch2和HES1 mRNA表達(dá)水平明顯升高；且JIA患兒組HES1與外周血中CD3+T細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)成正相關(guān)；JIA患兒血漿中IL-1β、IL-10、IL-6、IL-17、TGF-β水平升高，且IL-10表達(dá)水平與T/B/Th/抑制性T淋巴細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)成負(fù)相關(guān)，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；
　　（2）與對(duì)照組小鼠比較，CIA小鼠組B10細(xì)胞及Th17細(xì)胞表達(dá)水平升高

4、，細(xì)胞因子IL-10、IL-4和TGF-β水平降低，而IL-1β和IL-17A水平升高；B10細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中采用DAPT后，Notch1及Jagged1表達(dá)量下降，而Notch2、Notch3、Notch4、Jagged2及HES1表達(dá)量上升，而IL-10、IL-6、IL-17、TGF-β以及TNF-α細(xì)胞因子水平也明顯下降，且與正常對(duì)照組無(wú)差異(P＜0.05)。
　　結(jié)論：
　　通過(guò)本研究我們發(fā)現(xiàn)幼年特發(fā)性關(guān)節(jié)炎患兒Not