UVRAG和Rubicon在饑餓誘導的肝臟脂肪變性中的作用.pdf

1、UVRAG是一個自噬相關基因，其編碼蛋白通過與Beclin1結合增強Vps34/PI3KC3的活性，在促進自噬小體成熟中發(fā)揮重要作用。Rubicon與UVRAG相互作用，導致Vps34/PI3KC3的活性下調，抑制自噬小體成熟。我們的前期工作已證實，UVRAG基因缺失導致自噬小體與溶酶體融合受阻伴隨自噬小體增多；Rubicon基因缺失促進自噬。鑒于自噬能夠調控脂代謝，本文擬研究UVRAG和Rubicon在饑餓誘導的肝臟脂肪變性中的作用。

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　　為了研究UVRAG在饑餓誘導的肝臟脂肪變性中的作用，我們給予野生型小鼠和UVRAG基因缺失小鼠正常飲食或24小時饑餓處理。油紅染色顯示，在正常生理條件下小鼠肝臟無明顯脂質積聚，但是在饑餓條件下，野生型小鼠肝臟中脂質積聚明顯增多，UVRAG基因缺失導致肝臟脂質積聚比野生型小鼠進一步增多。肝臟脂質含量檢測結果顯示，饑餓處理的UVRAG基因缺失小鼠肝臟甘油三酯、游離脂肪酸和總膽固醇含量較野生型小鼠顯著升高，與油紅染色結果一致。實時

3、熒光定量RT-PCR顯示在正常生理及饑餓條件下，UVRAG基因缺失小鼠和相應的野生型小鼠肝臟脂代謝相關基因CD36、FAS、CPT-1、PPARα及FGF21表達無顯著差異。在正常生理條件下，SREBP1基因在UVRAG基因缺失小鼠肝臟表達顯著下調，但在饑餓條件下無顯著差異。此外，UVARG基因缺失對脂代謝調控分子AMPK活性無顯著影響。在饑餓條件下，UVRAG基因缺失導致血漿甘油三酯和游離脂肪酸濃度上升，而血糖濃度下降。
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4、ubicon基因缺失促進自噬，因此我們推測Rubicon基因缺失可以緩解饑餓誘導的肝臟脂肪變性。為了證實這一假說，我們給予野生型小鼠和Rubicon基因缺失小鼠正常飲食或24小時饑餓處理。意想不到的是，Rubicon基因缺失導致饑餓條件下肝臟脂質積聚較野生型小鼠進一步增多，并且肝臟甘油三酯、游離脂肪酸和總膽固醇含量顯著上調。實時熒光定量RT-PCR顯示，Rubicon基因缺失對正常生理及饑餓條件下肝臟脂代謝相關基因CD36、CPT-1、

5、PPARα、FGF21表達無影響。在饑餓條件下，Rubicon基因缺失小鼠肝臟SREBP1表達量在較野生型小鼠顯著上調，但在正常生理條件下無顯著差異。在正常生理條件下，F(xiàn)AS基因在Rubicon基因缺失小鼠肝臟表達量較野生型小鼠顯著上調，但在饑餓條件下無顯著差異。此外，在饑餓條件下，Rubicon基因缺失小鼠和野生型小鼠肝臟中AMPK活性無顯著差異。全身Rubicon基因缺失導致饑餓條件下血漿甘油三酯和游離脂肪酸濃度顯著升高。在正常生理