趨化因子CCL19對大腸癌增殖的作用.pdf

1、目的：研究CCL19對人大腸癌細胞增殖的影響
　　方法：構建慢病毒LV5-CCL19轉(zhuǎn)染腸癌細胞株，獲得過表達CCL19腸癌細胞株SW1116-CCL19和SW480-CCL19。通過細胞增殖實驗（CCK-8法）、流式細胞技術、軟瓊脂克隆形成試驗，小鼠體內(nèi)成瘤實驗，分別檢測上調(diào)CCL19后對SW1116及SW480細胞增殖、細胞周期的影響。免疫印跡檢測細胞內(nèi)以及胞漿內(nèi)，胞核內(nèi)β-catenin、cyclinD1表達。免疫組化檢測臨

2、床標本中CCL19與β-catenin表達關系。
　　結果：實時定量PCR及免疫印跡法驗證LV5-EF1a-Puro-CCL19慢病毒載體系統(tǒng)穩(wěn)定上調(diào)大腸癌細胞株SW1116及SW480的CCL19表達。增殖實驗，軟瓊脂克隆形成實驗提示CCL19高表達后腫瘤細胞增殖能力相比陰性對照組及空白對照組受到抑制。流式細胞周期及凋亡檢測顯示上調(diào)CCL19后，將大腸癌細胞阻滯于G1期，抑制腫瘤細胞增殖。凋亡檢測結果顯示，上調(diào)CCL19后，腫瘤

3、細胞凋亡相比陰性對照增加。免疫印跡結果表明，CCL19過表達后細胞內(nèi)總β-catenin表達量下降。細胞胞漿內(nèi)β-catenin表達量無明顯變化，胞核內(nèi)β-catenin表達量相比陰性對照組明顯下降。裸鼠體內(nèi)成瘤實驗結果顯示，上調(diào)CCL19后，腫瘤生長較陰性對照組受到抑制。臨床標本結果顯示，CCL19表達與β-catenin成負相關關系，CCL19高表達的病人相比CCL19低表達的病人腫瘤更小，浸潤層次更淺。
　　結論：研究證實，