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1、中國醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文維甲酸Ro408757對人大腸癌細(xì)胞系CCL187的增殖抑制作用及其機(jī)制姓名:呂晶申請學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):細(xì)胞生物學(xué)指導(dǎo)教師:宋今丹2002.4.1/實(shí)驗(yàn)材料I\人大腸癌細(xì)胞系CCL187由美國哈佛大學(xué)Dana—Farber腫瘤研究所惠贈(zèng);Ro40—8757,由DrMieheMClaus(FH0脅鋤一hRochehd,Basle,瑞士)惠贈(zèng)。實(shí)驗(yàn)方法CCL一187用含10%小牛血清的DMEM培養(yǎng)液,37℃,100
2、%濕度,5%CO:溫箱單層傳代培養(yǎng)。Ro40—8757以DMSO配制濃度為10。2mol/L貯存液,一;O℃避光保存,用時(shí)用培養(yǎng)液稀釋成相應(yīng)的濃度。將CCL一187細(xì)胞以3X103個(gè)/孔接種于4個(gè)96孔板上,培養(yǎng)24小時(shí)后,加入終濃度分別為3X10一、110一、310~、110~、3X10~moL/L的Ro40~8757各8復(fù)孔,并設(shè)8復(fù)孔對照,每隔3天更換藥物及新鮮培養(yǎng)液,分別培養(yǎng)3、69、12天后,用MTT法測定藥物對腫瘤細(xì)胞的增殖
3、抑制率。CCL一187加入終濃度分別為3X10一、l10~、310一、1X10~、310“mc眇L的Ro40一8757處理6天,并設(shè)一瓶對照組,對照組加等量的DMSO,倒置顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)并攝影。CCL一187加入終濃度為1X10一m彬L的Ro40一8757處理3、69、12天,并分別設(shè)對照組,對照組加等量的DMSO,掃描、透射電鏡觀察細(xì)胞形態(tài)并攝影。單層培養(yǎng)的CCL一187細(xì)胞加入110~moL/L的Ro40一8757培養(yǎng)36、9、
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