hBMP-2修飾β-TCP-I型膠原復(fù)合材料對(duì)MC3T3-E1細(xì)胞增殖的影響.pdf

1、目的：骨缺損和骨不連修復(fù)問(wèn)題一直非常棘手,人們嘗試許多方法,但都有缺陷。最近研究者們?cè)O(shè)計(jì)的仿生骨基質(zhì)材料,為了解決骨缺損及骨不連修復(fù)的這個(gè)棘手的難題提供了全新的修復(fù)的方法,本課題組不僅有效地利用了磷酸三鈣良好的生物降解特性和形貌變化特性以及載體的功能，而且還充分的利用了I型膠原良好的細(xì)胞和組織相容性，以及兩者結(jié)合所產(chǎn)生的協(xié)同效應(yīng),尤其是骨形態(tài)發(fā)生蛋白能夠誘導(dǎo)動(dòng)物或人的間充質(zhì)細(xì)胞分化成為骨、軟骨、韌帶、肌腱和神經(jīng)組織的特點(diǎn)，然后再利用質(zhì)粒

2、DNA作為基因的載體，制成含人的骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2為目的基因的質(zhì)粒包裹β-磷酸三鈣/I型膠原溶液支架材料形成的骨修復(fù)材料,并通過(guò)體外實(shí)驗(yàn)研究觀察這種復(fù)合材料的理化性能、生物相容性及其誘導(dǎo)、傳導(dǎo)成骨的能力,為骨組織高效重建創(chuàng)建良好的的初始平臺(tái)。
　　方法：制備納米級(jí)多孔β-TCP/膠原支架并負(fù)載含目的基因BMP2的質(zhì)粒DNA形成基因修飾的支架材料。建立復(fù)合支架材料與小鼠前成骨MC3T3-E1細(xì)胞株的體外培養(yǎng)體系。將其分為支架組（Z）

3、和平皿組(M)，再根據(jù)質(zhì)粒的不同濃度每組再分為2個(gè)小組。實(shí)驗(yàn)通過(guò)掃描電鏡、光鏡觀察細(xì)胞學(xué)形態(tài)，Alamar Blue法檢測(cè)細(xì)胞增殖，MuseTMCell Analyzer法檢測(cè)細(xì)胞周期，實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)Cdk2、Cdk4等細(xì)胞增殖基因。檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
　　結(jié)果：含人的骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2為目的基因的質(zhì)粒DNA修飾的納米β-磷酸三鈣/I型膠原溶液復(fù)合材料表面上面有大量大小不一孔隙；本研究說(shuō)明復(fù)合材料與單純含hBMP-2

4、為目的基因的質(zhì)粒DNA相比,更能促進(jìn)前成骨細(xì)胞黏附、增殖及功能代謝,表明其對(duì)前成骨細(xì)胞具有良好細(xì)胞相容性。
　　結(jié)論:含人的骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2為目的基因的質(zhì)粒DNA修飾的納米β-磷酸三鈣/I型膠原溶液復(fù)合材料具有促進(jìn)小鼠前成骨細(xì)胞增值的作用。含人的骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2為目的基因的質(zhì)粒DNA修飾的納米β-磷酸三鈣/I型膠原溶液復(fù)合材料對(duì)前成骨細(xì)胞的增殖作用均要優(yōu)于單純的含人的骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2為目的基因的質(zhì)粒DNA和單純的納米β-磷酸