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文檔簡介
1、目的:
探討格列齊特在正糖環(huán)境中對(duì)小鼠成骨細(xì)胞樣細(xì)胞 MC3T3-E1增殖、分化及凋亡的影響
方法
體外培養(yǎng)小鼠成骨細(xì)胞樣細(xì)胞MC3T3-E1,分為正常對(duì)照組和不同濃度格列齊特組(10μmol/L、20μmol/L、100μmol/L),格列齊特干預(yù)48h后,采用CCK-8檢測(cè)細(xì)胞增殖率,流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡率,熒光定量PCR檢測(cè)成骨細(xì)胞分化標(biāo)志物 I型膠原(COL- I)、骨橋蛋白(OPN)和成骨因子R
2、unt相關(guān)基因2(Runx2)基因的表達(dá),Western blots檢測(cè)凋亡蛋白(Bax)和抗凋亡蛋白(Bcl-2)的表達(dá)。
結(jié)果:
?。?)與對(duì)照組相比,不同濃度格列齊特均能促進(jìn)成骨細(xì)胞增殖,20μmol/L時(shí)促進(jìn)增殖的作用最強(qiáng),10μmol/L格列齊特組、20μmol/L格列齊特組、100μmol/L格列齊特組與對(duì)照組相比細(xì)胞增殖率依次增加16.6%,20.2%,13.7%(P<0.05)。
(2)對(duì)照組
3、、10μmol/L格列齊特組、20μmol/L格列齊特組、100μmol/L格列齊特組的早期凋亡率分別為:8.83%,5.47%,2.87%,7.33%。與對(duì)照組相比,不同濃度格列齊特均降低成骨細(xì)胞早期凋亡率(P<0.05),20μmol/L抑制凋亡作用最顯著。
?。?)與對(duì)照組相比,不同濃度格列齊特(10μmol/L、20μmol/L、100μmol/L)均能促進(jìn)功能蛋白COL-1、OPN、Runx2的mRNA的表達(dá)(P<0.
4、05),20μmol/L格列齊特作用最顯著,且COL-1、OPN與Runx2基因的表達(dá)呈顯著正相關(guān)(相關(guān)系數(shù)r分別為0.899、0.854,均P<0.01)。
(4)對(duì)照組、10μmol/L格列齊特組、20μmol/L格列齊特組、100μmol/L格列齊特組 Bcl-2/β-actin的值依次為1.22±0.025,1.48±0.035,1.81±0.066,1.30±0.015;Bax/β-actin的值依次為0.83±0.
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