口腔鱗狀細(xì)胞癌分泌的胞外體對其生物學(xué)行為的影響.pdf

1、目的：口腔鱗狀細(xì)胞癌(oral squamous cell carcinoma)是口頜系統(tǒng)中經(jīng)常發(fā)生的惡性癌變,極其嚴(yán)重的危害著人類的健康。本實驗將通過口腔鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞細(xì)胞株（OSC-3、OSC-4）分泌的胞外體，研究其對細(xì)胞生物學(xué)行為的影響。
　　方法：分別培養(yǎng)OSC-3、OSC-4兩種類型的口內(nèi)鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞，從OSC-3、OSC-4的上清培養(yǎng)液中分離提純胞外體（exosome, EXO），取正常的OSC-3和OSC-4作為

2、對照組，有胞外體作用后的OSC-3和OSC-4作為實驗組。使用免疫金標(biāo)技術(shù)找到胞外體膜上的CD9。將提取的胞外體作用于OSC-3和OSC-4，MTT實驗分別檢測胞外體對OSC-3和OSC-4增殖能力的影響；細(xì)胞劃痕實驗各自觀察胞外體對OSC-3和OSC-4遷移能力的結(jié)果；transwell小室侵襲實驗分別檢測胞外體對OSC-3和OSC-4侵襲能力的作用。
　　結(jié)果：細(xì)胞上清液提取物免疫金標(biāo)結(jié)果可見金標(biāo)記的CD9，即分離提純物為胞外

3、體；MTT檢測結(jié)果顯示胞外體作用后的OSC-3和OSC-4的增殖能力24h、48h、72h組均增強(qiáng)；細(xì)胞劃痕實驗結(jié)果顯示胞外體作用后的OSC-3和OSC-4的遷移能力增強(qiáng)；Transwell實驗結(jié)果表明加入胞外體組的OSC-3和OSC-4的細(xì)胞被染色的數(shù)量明顯多于對照組,對細(xì)胞計數(shù)后進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析，OSC-3和OSC-4加入胞外體組侵襲細(xì)胞的數(shù)目明顯多于對照組,顯示其侵襲能力也增強(qiáng)。
　　結(jié)論：OSC-3和OSC-4分泌的胞外體可