谷氨酰胺轉(zhuǎn)運(yùn)體SLC1A5在突變型和野生型EGFR非小細(xì)胞肺癌中的功能研究.pdf

1、目的:
　　從全球范圍來(lái)看，肺癌是發(fā)病率和死亡率最高的腫瘤，非小細(xì)胞肺癌是肺癌最常見(jiàn)的類型，約占它總數(shù)的85％，對(duì)人類健康造成很大的威脅。SLC1A5谷氨酰胺轉(zhuǎn)運(yùn)體是位于細(xì)胞膜上的一種跨膜糖蛋白，功能是將胞外的谷氨酰胺轉(zhuǎn)運(yùn)進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，為細(xì)胞的代謝提供底物，在包括非小細(xì)胞肺癌在內(nèi)的很多癌細(xì)胞中高表達(dá)。癌細(xì)胞非常依賴谷氨酰胺，以維持癌細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖。此前有文獻(xiàn)報(bào)道，SLC1A5能影響非小細(xì)胞肺癌的生長(zhǎng)與存活。而進(jìn)一步的臨床研究也顯示

2、，SLC1A5的表達(dá)是肺腺癌預(yù)后的一個(gè)重要指標(biāo)，在EGFR無(wú)突變的患者中，它的表達(dá)水平越高說(shuō)明預(yù)后效果越差。也有文獻(xiàn)報(bào)道，SLC1A5與EGFR之間存在相互作用，但其作用機(jī)制及下游信號(hào)通路并不清楚。本課題將進(jìn)一步研究SLC1A5在突變型和野生型EGFR非小細(xì)胞肺癌中的功能，探討非小細(xì)胞肺癌中SLC1A5與EGFR的關(guān)系，SLC1A5功能與EGFR突變的相關(guān)性，以及其中的分子機(jī)制。
　　方法：
　　(1)選擇六株非小細(xì)胞肺癌細(xì)

3、胞（HCC827，HCC827ER，PC-9，NCI-H1975，A549和H358）作為研究對(duì)象，其中HCC827，HCC827ER，PC-9和NCI-H1975細(xì)胞是攜帶有EGFR突變的癌細(xì)胞，A549和H358是野生型EGFR癌細(xì)胞。
　　(2)用Western blot檢測(cè)不同條件處理下的SLC1A5蛋白水平。
　　(3)加SLC1A5抑制劑GPNA處理，檢測(cè)非小細(xì)胞肺癌的生長(zhǎng)情況，及相關(guān)通路蛋白水平的變化。

4、　　(4)干擾SLC1A5，檢測(cè)非小細(xì)胞肺癌的生長(zhǎng)情況，及相關(guān)通路蛋白水平的變化。
　　結(jié)論：
　　(1)SLC1A5蛋白水平在耐藥細(xì)胞中上調(diào)；
　　(2)SLC1A5抑制劑GPNA逆轉(zhuǎn)HCC827ER細(xì)胞的耐藥性，且作用強(qiáng)于谷氨酰胺酶抑制劑968；
　　(3)耐藥細(xì)胞NCI-1975對(duì)SLC1A5轉(zhuǎn)運(yùn)體的依賴程度顯著小于HCC827ER細(xì)胞；
　　(4)SLC1A5蛋白表達(dá)水平在野生型EGFR細(xì)胞中明顯高