谷氨酰胺轉運體SLC1A5在突變型和野生型EGFR非小細胞肺癌中的功能研究.pdf

1、目的:
　　從全球范圍來看，肺癌是發(fā)病率和死亡率最高的腫瘤，非小細胞肺癌是肺癌最常見的類型，約占它總數(shù)的85％，對人類健康造成很大的威脅。SLC1A5谷氨酰胺轉運體是位于細胞膜上的一種跨膜糖蛋白，功能是將胞外的谷氨酰胺轉運進入細胞內，為細胞的代謝提供底物，在包括非小細胞肺癌在內的很多癌細胞中高表達。癌細胞非常依賴谷氨酰胺，以維持癌細胞的生長和增殖。此前有文獻報道，SLC1A5能影響非小細胞肺癌的生長與存活。而進一步的臨床研究也顯示

2、，SLC1A5的表達是肺腺癌預后的一個重要指標，在EGFR無突變的患者中，它的表達水平越高說明預后效果越差。也有文獻報道，SLC1A5與EGFR之間存在相互作用，但其作用機制及下游信號通路并不清楚。本課題將進一步研究SLC1A5在突變型和野生型EGFR非小細胞肺癌中的功能，探討非小細胞肺癌中SLC1A5與EGFR的關系，SLC1A5功能與EGFR突變的相關性，以及其中的分子機制。
　　方法：
　　(1)選擇六株非小細胞肺癌細

3、胞（HCC827，HCC827ER，PC-9，NCI-H1975，A549和H358）作為研究對象，其中HCC827，HCC827ER，PC-9和NCI-H1975細胞是攜帶有EGFR突變的癌細胞，A549和H358是野生型EGFR癌細胞。
　　(2)用Western blot檢測不同條件處理下的SLC1A5蛋白水平。
　　(3)加SLC1A5抑制劑GPNA處理，檢測非小細胞肺癌的生長情況，及相關通路蛋白水平的變化。

4、　　(4)干擾SLC1A5，檢測非小細胞肺癌的生長情況，及相關通路蛋白水平的變化。
　　結論：
　　(1)SLC1A5蛋白水平在耐藥細胞中上調；
　　(2)SLC1A5抑制劑GPNA逆轉HCC827ER細胞的耐藥性，且作用強于谷氨酰胺酶抑制劑968；
　　(3)耐藥細胞NCI-1975對SLC1A5轉運體的依賴程度顯著小于HCC827ER細胞；
　　(4)SLC1A5蛋白表達水平在野生型EGFR細胞中明顯高