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文檔簡介
1、目的:肝細胞生長因子(hepatocyte growth factor,HGF)受體(c-Met)可能與非小細胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)對厄羅替尼耐藥有關。本研究旨在體外研究HGF誘導EGFR突變型及野生型NSCLC細胞對厄羅替尼耐藥及可能的耐藥機制。
方法:選擇EGFR突變型及野生型NSCLC細胞(PC9、A549)。實驗分為四組:C組(control)、H組(HGF)、E組(
2、erlotinib)、HE組(HGF+erlotinib)。用HGF誘導或(和)厄羅替尼處理細胞,通過MTT法檢測細胞增殖,PI法檢測細胞周期,Annexin V-FITC法檢測細胞凋亡,Western blotting檢測細胞中c-Met、EGFR、ErbB3及其磷酸化蛋白的表達。
結果:厄羅替尼對這兩種細胞的生長抑制作用均呈濃度依賴性,厄羅替尼對HGF誘導的藥物-存活率曲線明顯往右移。在每種細胞分組中,HE組凋亡率均比E組
3、減少(P<0.05)。在A549細胞中,HE組與E組比較,G0/G1期比例減少(P<0.05)、S期比例增多(P<0.05)。HGF能活化這兩種細胞中p-Met蛋白。在這兩種細胞中,HE組與E組比較,p-Met蛋白含量則明顯升高,p-EGFR、p-ErbB3蛋白含量無明顯差異。
結論:在體外HGF誘導EGFR突變型及野生型NSCLC細胞株對厄羅替尼耐藥,c-Met磷酸化活化可能是HGF誘導NSCLC細胞株對厄羅替尼耐藥的重要機
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