野生型-突變型WISP3對(duì)人軟骨細(xì)胞IGF信號(hào)通路的影響.pdf_第1頁(yè)
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1、目的：WISP3通過(guò)調(diào)節(jié)Ⅱ型膠原和蛋白聚糖的合成維持軟骨穩(wěn)定性。晚發(fā)型脊柱骨骺發(fā)育不良伴進(jìn)行性骨關(guān)節(jié)病(SEDT-PA)相關(guān)型WISP3突變能阻斷此功能而引起軟骨丟失。本實(shí)驗(yàn)探討了WISP3對(duì)人軟骨細(xì)胞IGF信號(hào)通路的影響，并對(duì)野生型及突變型WISP3對(duì)人軟骨細(xì)胞IGF信號(hào)通路活化的差異進(jìn)行了研究。 方法：以重組人WISP3蛋白與重組IGF-I蛋白干預(yù)T/C-28a2細(xì)胞，以野生型及突變型WISP3(1000T/C和840del

2、T)轉(zhuǎn)染C20/A4細(xì)胞。以免疫沉淀法檢測(cè)IGF-IR β和IRS-1的磷酸化，以免疫印記法檢測(cè)ERK1/2和Akt的磷酸化，從而評(píng)估WISP3對(duì)IGF信號(hào)通路活化的影響。 結(jié)果：重組人WISP3蛋白抑制T/C-28a2細(xì)胞IGF-I誘導(dǎo)的IGF-IR β和其下游IRS-1及ERK1/2的活化。與空白轉(zhuǎn)染組相比，野生型WISP3的穩(wěn)定轉(zhuǎn)染能抑制C20/A4細(xì)胞IGF-IR及其下游IRS-1和ERK1/2的活化，突變型WISP3的

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