山柰酚對(duì)過(guò)敏性鼻炎體內(nèi)外的影響及相關(guān)機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、背景與目的：過(guò)敏性鼻炎是一種常見(jiàn)的難治性的耳鼻咽喉科疾病，它所表現(xiàn)出來(lái)的臨床癥狀嚴(yán)重的影響著病人的生活質(zhì)量。山柰酚是一種從姜科植物山柰以及檀香科植物百蕊草中所提取的天然黃酮類(lèi)化合物，具有很強(qiáng)的抗炎和抗過(guò)敏效應(yīng)。本次實(shí)驗(yàn)旨在研究山柰酚對(duì)過(guò)敏性鼻炎體內(nèi)外的影響，并探討其相關(guān)的作用機(jī)制。
　　方法：在體內(nèi)，通過(guò)使用卵清蛋白OVA對(duì)豚鼠進(jìn)行腹腔注射和局部滴鼻刺激建立豚鼠過(guò)敏性鼻炎模型，不同濃度的山柰酚（5 mg/kg、20 mg/kg）和

2、氯雷他定（2 mg/kg）分別對(duì)豚鼠進(jìn)行灌胃給藥。通過(guò)記錄豚鼠的抓鼻和打噴嚏次數(shù)，評(píng)價(jià)豚鼠過(guò)敏性鼻炎的癥狀；HE染色觀察豚鼠鼻黏膜病理形態(tài)的改變及鼻黏膜中嗜酸性粒細(xì)胞的浸潤(rùn)數(shù)量；通過(guò)豚鼠脾臟指數(shù)來(lái)確定豚鼠機(jī)體炎癥反應(yīng)的狀況；ELISA法檢測(cè)豚鼠血清中組胺、IgE、IL-4、IL-6、IL-8、IL-1β和TNF-α的水平。在體外，利用MTT法檢測(cè)山柰酚對(duì)肥大細(xì)胞的細(xì)胞毒性作用，并確定山柰酚的給藥濃度。分別用化合物48/80和脂多糖（LP

3、S）刺激肥大細(xì)胞使肥大細(xì)胞處于致敏狀態(tài)，不同濃度的山柰酚（10、20、40μmol·L-1）作用于處于致敏狀態(tài)的肥大細(xì)胞，利用甲苯胺藍(lán)染色觀察肥大細(xì)胞的脫顆粒狀態(tài)；ELISA法檢測(cè)細(xì)胞上清液中組胺、IL-6、IL-8、IL-1β、TNF-α的水平。Western blot檢測(cè)經(jīng)不同濃度的山柰酚作用于LPS活化的肥大細(xì)胞后，胞質(zhì)中p-IKKβ、IκBα、p-IκBα和胞核中NF-κB(p65)蛋白水平。
　　結(jié)果：在體內(nèi)，山柰酚能明

4、顯改善豚鼠過(guò)敏性鼻炎的癥狀（P<0.05），降低血清中組胺、IgE、IL-4、IL-6、IL-8、IL-1β和TNF-α的水平（P<0.05）。然而，豚鼠的脾臟指數(shù)基本沒(méi)有改變(P>0.05)。在光鏡下觀察，山柰酚會(huì)明顯改善豚鼠鼻黏膜的病理形態(tài)和減少嗜酸性粒細(xì)胞的浸潤(rùn)。在體外，根據(jù) MTT法的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，確定了山柰酚的給藥濃度范圍為5μmol·L-1到40μmol·L-1。山柰酚能夠改善致敏的肥大細(xì)胞脫顆粒的狀態(tài)，并且使處于致敏狀態(tài)的肥大