胃癌NES1基因的表達(dá)及相關(guān)機(jī)制的體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)初探.pdf

1、Y105_2巫溜≥活爻毽太冬SHANGHAlJlAOTONGUNIVERSITY博士學(xué)位論文DoCToRAI，DI』SJSERTATIoN論文題目胃癌NES1基因的表達(dá)及相關(guān)機(jī)制的體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)初探學(xué)科專業(yè)作者姓名指導(dǎo)教師答辯日期內(nèi)科學(xué)(消化系病)鐘捷江石湖教授二OO七年五月NESImRNA及其蛋白的表達(dá)。應(yīng)用激光捕獲顯微切割分離純化腫瘤組織，并采用甲基化特異性PCR(MSP)法檢測(cè)藥物處理前后的甲基化狀態(tài)變化。結(jié)果NESImRNA和蛋白在

2、Ⅶ(N一45，SGC一7901，AGS，MKN28，HGC一2胃癌細(xì)胞株中的表達(dá)均明顯低于正常對(duì)照(GES一1，永生化的人胃粘膜上皮細(xì)胞)(P001)。NESI基因外顯子3在SGC7901細(xì)胞中是完全甲基化的，而在MKN一28、MKN一45、HGC一27中是部分甲基化的。經(jīng)去甲基化藥物5一雜氮一2’一脫氧胞苷(5一aza—dC)處理后，五種胃癌細(xì)胞株中NESImRNA的表達(dá)均上調(diào)，并在SGC7901、MKN28、MKN45三種細(xì)胞株中呈

3、劑量依賴效應(yīng)。經(jīng)檢測(cè)，NESI的表達(dá)主要定位在細(xì)胞漿。1l例NESImRNA表達(dá)降低的胃癌組織中有10例NESI外顯子3存在甲基化。5aza—dC對(duì)人胃癌裸鼠移植瘤的生長(zhǎng)有明顯的抑制作用，用藥組與對(duì)照組相比，其抑瘤率為5744％，移植瘤體積差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p001)；5aza—dC可使NESI基因外顯子3去甲基化，且能使NESI基因重新表達(dá)。結(jié)論INESI基因在胃癌細(xì)胞株和組織中存在特異性表達(dá)缺失2NESI基因胃癌特異性表達(dá)缺失與外