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文檔簡介
1、目的:通過觀察支氣管哮喘患者使用熱咳喘膠囊前后血清中高遷移率族蛋白B1(HMGB1)的表達(dá)、嗜酸性粒細(xì)胞(EOS)計(jì)數(shù)、肺功能、癥狀、體征、中醫(yī)證候療效,了解熱咳喘膠囊對哮喘患者HMGB1的影響及臨床療效;通過觀察使用熱咳喘膠囊前后HMGB1、EOS在哮喘大鼠肺組織、氣道、肺泡灌洗液(BALF)中的表達(dá)及病理改變,進(jìn)一步了解HMGB1、EOS與哮喘發(fā)病的相關(guān)性及熱咳喘膠囊對哮喘大鼠HMGB1、EOS、病理改變的影響。
方法:臨
2、床觀察,將符合“納入標(biāo)準(zhǔn)”的50例研究對象進(jìn)行分組,其中哮喘患者隨機(jī)分為常規(guī)組、熱咳喘組,每組20例,正常組為健康志愿者10例,常規(guī)組給予西醫(yī)常規(guī)治療,熱咳喘組在常規(guī)治療基礎(chǔ)上給予熱咳喘膠囊口服,療程均為7天。常規(guī)組、熱咳喘組采用ELISA法檢測治療前后血中HMBG1水平及EOS計(jì)數(shù)、肺功能(FEV1%、PEF%),并記錄治療前后癥狀、體征、中醫(yī)證候積分。正常組僅在入組時(shí)抽血做HMGB1及EOS檢測。
動(dòng)物實(shí)驗(yàn),①建立哮喘大鼠
3、模型,選取10只雄性SD大鼠隨機(jī)分為正常組和模型組,每組5只。模型組第1天、8天、15天腹腔注射OVA/AL(OH)3致敏,第15天起OVA霧化激發(fā)7天,正常組致敏、激發(fā)藥物均為同等量生理鹽水,激發(fā)7天,并根據(jù)大鼠行為學(xué)及病理學(xué)結(jié)果判定哮喘大鼠模型是否成功。②選取雄性SD大鼠60只隨機(jī)分為6組,分別為正常組10只、模型組10只、地塞米松組10只、熱咳喘低劑量組10只、熱咳喘中劑量組10只、熱咳喘高劑量組10只。致敏及激發(fā)方法同前。從第1
4、5日起,地塞米松組每日腹腔注射地塞米松、熱咳喘低、中、高劑量組分別按熱咳喘膠囊0.525g/kg、1.05g/kg、2.10g/kg灌胃,正常組和模型組給予等同量生理鹽水灌胃,共14天。末次激發(fā)6小時(shí)內(nèi)留取大鼠肺組織及氣道標(biāo)本,進(jìn)行HE染色,觀察肺組織及氣道病理學(xué)改變,并采用免疫組化法檢測HMGB1在各組大鼠氣道的表達(dá)情況。提取BALF,鏡下檢測EOS計(jì)數(shù)、EALIS法檢測HMGB1含量。
結(jié)果:
臨床觀察:
5、 1、癥狀、體征、中醫(yī)證候療效比較:治療前后比較,兩組癥狀、體征單項(xiàng)積分、總積分差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;治療后,熱咳喘組積分較常規(guī)組減低,其中單項(xiàng)積分差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,而總積分差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;常規(guī)組總有效率為85%,熱咳喘組總有效率為95%,熱咳喘組較常規(guī)組總有效率高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2、肺功能FEV1%、PEF%比較:常規(guī)組和熱咳喘組治療后均高于治療前,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,治療后,兩組FEV1%、PEF%均升高,但差異無
6、統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
3、血清HMGB1、外周血EOS比較:治療后,常規(guī)組和熱咳喘組均低于治療前,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,熱咳喘組較常規(guī)組有所下降,但差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
動(dòng)物實(shí)驗(yàn):
1、肺組織病理改變: HE染色顯示模型組支氣管粘膜以及血管周圍可見大量炎性細(xì)胞浸潤,主要是EOS為主,支氣管腔變狹窄、管壁有所增厚,氣道平滑肌斷裂,增厚,形狀不規(guī)則,氣道內(nèi)上皮細(xì)胞脫落,粘膜下水腫明顯;熱咳喘低劑量組支氣管壁增厚,可見氣道
7、平滑肌斷裂,管周見多量EOS、中性粒細(xì)胞(NEU)及淋巴細(xì)胞(Ly)浸潤;熱咳喘中、高劑量組與地塞米松組支氣管壁相對完整,偶見平滑肌斷裂,管周見極少量EOS、NEU、Ly浸潤。
2、BALF中HMGB1含量及EOS計(jì)數(shù)、肺組織中HMGB1的表達(dá):三個(gè)指標(biāo)由高到低排列的順序是:模型組、熱咳喘低劑量組、熱咳喘中劑量組、熱咳喘高劑量組、地塞米松組、正常組,HMGB1主要表達(dá)于氣道平滑肌細(xì)胞、氣道上皮細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞。與正常組比較,模型
8、組、熱咳喘低、中、高劑量組、地塞米松組均增高,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;與模型組比較,熱咳喘中、高劑量組、地塞米松組均低于模型組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;熱咳喘低劑量組低于模型組,但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;熱咳喘高劑量組低于中劑量組,但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;地塞米松組低于中、高劑量組,但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
結(jié)論:
1.HMGB1可能參與了哮喘氣道炎癥的形成。
2.熱咳喘膠囊可能通過抑制HMGB1、EOS減輕大鼠氣道炎癥。
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