基于尤斯灌流池技術(shù)的澤瀉湯腸吸收研究及藥代動(dòng)力學(xué)考察.pdf

1、澤瀉湯出自東漢張仲景的《金匱要略》，由澤瀉和白術(shù)兩味藥組成，是臨床治療痰飲眩暈、水腫、高脂血等癥的要方。本文Ussing chamber法分析澤瀉湯中澤瀉對(duì)白術(shù)藥材中白術(shù)內(nèi)酯成分在大鼠離體腸段跨膜吸收特征的影響，同時(shí)建立澤瀉湯體內(nèi)分析方法，研究澤瀉對(duì)白術(shù)藥材中白術(shù)內(nèi)酯成分在體內(nèi)吸收的影響，以體內(nèi)體外相互印證的方法分析澤瀉湯復(fù)方中澤瀉對(duì)白術(shù)藥材中白術(shù)內(nèi)酯成分口服吸收的影響，為澤瀉湯口服制劑研究提供一定參考，具體如下：
　　建立白術(shù)內(nèi)

2、酯Ⅱ及白術(shù)內(nèi)酯ⅢLC-MS體外分析方法:采用Agilent ZorbaxPlusC18色譜柱，流動(dòng)相為乙腈-0.1％甲酸水（42:58），流速:0.3 mL/min。電噴霧離子源，陽(yáng)離子MRM模式，白術(shù)內(nèi)酯Ⅱ和白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ的定量離子分別為m/z233.2→m/z187, m/z249.15→m/z231。Ussing chamber法考察澤瀉湯的腸吸收，樣品經(jīng)10000 r/min離心15 min后，LC-MS分析。該方法專屬性強(qiáng)，靈敏度

3、高，可用于白術(shù)內(nèi)酯體外透過(guò)研究。
　　研究澤瀉湯中成分白術(shù)內(nèi)酯在不同腸段的跨膜吸收特征。白術(shù)內(nèi)酯Ⅱ在各腸段的表觀滲透系數(shù)（Papp）分別為十二指腸(10.11±2.36)×10-6 cm/s，空腸(10.28±1.92)×10-6 cm/s，回腸(10.98±3.55)×10-6 cm/s，結(jié)腸(21.20±3.46)×10-6 cm/s，白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ在各腸段的表觀滲透系數(shù)（Papp）分別為十二指腸(2.52±0.47)×10-6

4、cm/s，空腸(2.47±0.41)×10-6 cm/s，回腸(3.46±0.67)×10-6 cm/s，結(jié)腸(4.62±0.54)×10-6 cm/s。兩者在結(jié)腸段的表觀滲透系數(shù)均大于其他腸段且有極顯著性差異(p<0.01)，表明在本實(shí)驗(yàn)條件下白術(shù)內(nèi)酯Ⅱ、白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ在大鼠結(jié)腸跨膜吸收能力優(yōu)于其他腸段。
　　在相同白術(shù)藥材給藥量的情況下，另以白術(shù)單獨(dú)提取藥液研究澤瀉湯中澤瀉對(duì)白術(shù)內(nèi)酯跨膜吸收影響。選取上部分研究中透過(guò)性最好的結(jié)腸段

5、，給藥進(jìn)行對(duì)比。白術(shù)與澤瀉合煎后，白術(shù)內(nèi)酯ⅡPapp值由（7.09±1.09)×10-6 cm/s提高至(20.22±3.46)×10-6 cm/s，白術(shù)內(nèi)酯ⅢPapp值由(1.06±0.12)×10-6 cm/s提高至(4.62±0.54)×10-6 cm/s，且有極顯著性差異(p<0.01)。表明在本實(shí)驗(yàn)條件下在大鼠結(jié)腸段，澤瀉共煎可促進(jìn)白術(shù)藥材中白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ與白術(shù)內(nèi)酯Ⅱ的跨膜吸收。
　　藥代動(dòng)力學(xué)是定量研究藥物在生物體內(nèi)吸收、

6、分布、代謝和排泄規(guī)律，并運(yùn)用數(shù)學(xué)原理和方法闡述血藥濃度隨時(shí)間變化的規(guī)律的一門學(xué)科?？蔀樗幬镅邪l(fā)、劑型選擇、毒性研究提供一定的依據(jù)。
　　本文建立白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ體內(nèi)分析方法，以五味子醇甲為內(nèi)標(biāo)，LC-MS分析白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ口服后在大鼠體內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)。在相同白術(shù)藥材給藥量的情況下，分別以澤瀉湯干膏、白術(shù)單提干膏灌胃給藥，研究大鼠體內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)。以澤瀉湯干膏灌胃給藥后，白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ給藥劑量為2.57mg/kg,在體內(nèi)吸收達(dá)峰時(shí)間為52.50±24

7、.65min，達(dá)峰濃度為58.25±38.31 ng/ml，AUC（0-t）為17165.73±15286.46ng/（ml·min），AUC（0–∞）為26852.78±15131.42 ng/（ml·min）。以白術(shù)單提干膏給藥后，白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ給藥劑量為4.77 mg/kg,在體內(nèi)吸收達(dá)峰時(shí)間為50.00±22.58min，達(dá)峰濃度為54.53±20.04ng/mL，AUC（0-t）為12886.53±4783.841 ng/（ml·

8、min），AUC（0–∞）為15126.17±4331.323ng/（ml·min）。
　　以澤瀉湯干膏給藥，白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ給藥劑量低于白術(shù)單提干膏給藥。澤瀉湯干膏與白術(shù)單提干膏藥代動(dòng)力學(xué)結(jié)果相比，達(dá)峰時(shí)間相同，均為50min左右，達(dá)峰濃度較接近，但藥物濃度-時(shí)間曲線下面積有一定差別。澤瀉湯干膏給藥后的 AUC（0-t）相較于白術(shù)單提干膏給藥后的AUC（0-t）提高了33.21%，澤瀉湯干膏給藥后的AUC（0–∞）相較于白術(shù)單提干膏給