Keap1對人非小細(xì)胞肺癌生長的影響及其機(jī)制研究.pdf

1、在非小細(xì)胞肺癌A549、H460細(xì)胞株中,由于Keap1基因突變使Nrf2基因過表達(dá),導(dǎo)致A549、H460細(xì)胞獲得生存優(yōu)勢,并對抗腫瘤藥物產(chǎn)生了耐藥性,尤其是多藥耐藥性。我實(shí)驗(yàn)室曲麗艷等將野生型mKeap1-pEGFP基因轉(zhuǎn)染非小細(xì)胞肺癌A549細(xì)胞后,經(jīng)篩選得到穩(wěn)定表達(dá)Keap1的A549-mKeap1-pEGFP細(xì)胞株,體外實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)其Nrf2及其調(diào)控基因HO-1、NQO1等的表達(dá)顯著降低,使抗腫瘤藥物順鉑、奧沙利鉑等對此細(xì)胞株的抗

2、增殖作用增強(qiáng)。目前有關(guān)此細(xì)胞株的在體實(shí)驗(yàn)尚未見報(bào)道。目的:建立Keap1基因過表達(dá)的非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞株裸鼠皮下移植瘤模型,觀察不同細(xì)胞株的成瘤性和生長差異。方法:本文第一部分,探索以非小細(xì)胞肺癌不同細(xì)胞株建立裸鼠移植瘤模型的可靠方法,包括改變細(xì)胞的數(shù)量以及采用裸鼠移植瘤瘤塊組織接種的方法,并同時(shí)驗(yàn)證前面有關(guān)Keap1與非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞生長差異的關(guān)系的觀點(diǎn)。本文第二部分,將野生型Keap1基因過表達(dá)的細(xì)胞株A549-mKeap1-pEGF

3、P與對照細(xì)胞株A549-pEGFP接種于Balb/c無胸腺裸鼠皮下,觀察記錄二者所形成移植瘤的生長情況和成瘤性差異。結(jié)果:[1]野生型Keap1過表達(dá)的A549-mKeap1-pEGFP細(xì)胞株與A549-pEGFP細(xì)胞株相比,細(xì)胞增殖程度、在裸鼠體內(nèi)成瘤性等均降低,二者之間有顯著性差異。[2]成功地以裸鼠移植瘤瘤塊移植等方法建立A549、H460細(xì)胞株裸鼠移植瘤模型,成瘤率較高,成瘤較快且腫瘤均一性較好。結(jié)論:Keap1基因過表達(dá)對非小