TRIM29對(duì)鼻咽癌細(xì)胞的生長(zhǎng)、遷移和侵襲的影響.pdf

1、目的:研究TRIM29基因在高轉(zhuǎn)移鼻咽癌細(xì)胞系5-8F和低轉(zhuǎn)移鼻咽癌細(xì)胞系6-10B中的表達(dá)水平及其對(duì)鼻咽癌細(xì)胞增殖、細(xì)胞周期分布、細(xì)胞遷移能力和細(xì)胞侵襲能力的影響，了解其與鼻咽癌的關(guān)系，揭示其在鼻咽癌細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移中的作用。
　　方法:(1)采用qRT-PCR(Quantitative Reverse TranscriptionPolymerase Chain Reaction)和蛋白印跡法(Western Blotting)分別

2、檢測(cè)5-8F細(xì)胞和6-10B細(xì)胞中TRIM29基因的mRNA和蛋白表達(dá)水平;(2)脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法將TRIM29特異性siRNA載體和空白載體分別轉(zhuǎn)染5-8F細(xì)胞，將TRIM29表達(dá)載體和空白載體分別轉(zhuǎn)染6-10B細(xì)胞，建立穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞系;(3)采用Western Blotting檢測(cè)細(xì)胞中TRIM29蛋白表達(dá)水平的變化;MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖能力的變化;流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期分布的變化;劃痕實(shí)驗(yàn)觀察細(xì)胞遷移能力的變化;Transwell實(shí)驗(yàn)

3、檢測(cè)細(xì)胞侵襲能力的變化。采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。
　　結(jié)果:(1)5-8F細(xì)胞中TRIM29的表達(dá)水平明顯高于6-10B細(xì)胞;(2)建立了TRIM29低表達(dá)的5-8F細(xì)胞系、TRIM29高表達(dá)的6-10B細(xì)胞系及其空白載體穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞系;(3)與空白載體轉(zhuǎn)染的5-8F細(xì)胞和未轉(zhuǎn)染5-8F細(xì)胞比較，特異性siRNA轉(zhuǎn)染的TRIM29低表達(dá)5-8F細(xì)胞的增殖能力降低，G0/G1期細(xì)胞增加，而S期細(xì)胞減少，細(xì)胞遷移能力