TWIST2在神經(jīng)膠質(zhì)瘤中的表達(dá)及初步機制研究.pdf

1、目的：
　　1、檢測TWIST2在不同級別人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤中的表達(dá)情況；
　　2、研究TWIST2是否與膠質(zhì)瘤的惡性程度相關(guān)，探討其可能發(fā)生機制。
　　方法：
　　1、收集南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院神經(jīng)外科2010－2015年手術(shù)切除后的60神經(jīng)膠質(zhì)瘤病例及20例非腫瘤腦組織標(biāo)本。要求臨床及病理學(xué)資料完整。依據(jù)WHO(2007年)分級標(biāo)準(zhǔn)及實驗需要將其分為四組，每組20例。即第一組：非腫瘤組（Control）；第二組：W

2、HOII組；第三組：WHOIII組；第四組WHOIV組。使用免疫組織化學(xué)檢測各組標(biāo)本中TWIST2蛋白表達(dá)水平。
　　2、收集南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院神經(jīng)外科2014-2015年膠質(zhì)瘤手術(shù)患者新鮮標(biāo)本61例（其中WHOII組16例、WHOIII組21例、WHOIV組24例，術(shù)后已經(jīng)病理證實）及非腫瘤腦組織12例。使用實時熒光定量核酸擴增檢測技術(shù)（qRT-PCR）和Westernblot分別檢測各組新鮮標(biāo)本中TWIST2mRNA和蛋白表

3、達(dá)水平。同時使用Westernblot分別檢測各組新鮮標(biāo)本中E-cadherin、N-cadherin、Vimentin蛋白表達(dá)水平。
　　結(jié)果：
　　1、免疫組化法回顧性分析不同級別膠質(zhì)瘤中TWIST2蛋白表達(dá)，結(jié)果顯示：60例膠質(zhì)瘤中存在TWIST2蛋白表達(dá)陽性54例（90％），20例非瘤腦組織中存在TWIST2蛋白表達(dá)陽性6例（30%），膠質(zhì)瘤組較非瘤腦組織TWIST2蛋白表達(dá)更高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（Z=﹣5.422,

4、P<0.01）；WHOIII較WHOII級TWIST2蛋白表達(dá)量更高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（Z=﹣4.062,P<0.01）,WHOIV較WHOIII級TWIST2蛋白表達(dá)量更高，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（Z=﹣0.953,P﹥0.05）,WHOIV較WHOII級TWIST2蛋白表達(dá)量更高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（Z=﹣4.953,P<0.01）；.
　　2、WesternBlot、qRT-PCR方法檢測TWIST2在膠質(zhì)瘤與非瘤腦組織中的表達(dá)，結(jié)

5、果均顯示：膠質(zhì)瘤中存在TWIST2的表達(dá)，且其在膠質(zhì)瘤中的表達(dá)較非瘤腦組織表達(dá)量更高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01）；且WHOIII、WHOIV.均較WHOII級更高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01）。
　　3、WesternBlot檢測新鮮膠質(zhì)細(xì)胞瘤標(biāo)本中E-cadherin、N-cadherin、Vimentin蛋白的表達(dá)水平，結(jié)果顯示：膠質(zhì)瘤中E-cadherin蛋白表達(dá)水平與TWIST2蛋白表達(dá)水平呈負(fù)相關(guān)（r=﹣0.9

6、72,P<0.01）；膠質(zhì)瘤中N-cadherin蛋白表達(dá)水平與TWIST2蛋白表達(dá)水平呈正相關(guān)（r=0.971,P<0.01）；膠質(zhì)瘤中Vimentin蛋白表達(dá)水平與TWIST2蛋白表達(dá)水平呈正相關(guān)（r=0.968,P<0.01）；
　　結(jié)論：
　　1、TWIST2在人神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞瘤中存在表達(dá)，且膠質(zhì)瘤等級與TWIST2的表達(dá)量呈正相關(guān)。
　　2、TWIST2基因可能通過上皮-間充質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)化(ePithelial-m