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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
探討HELQ對(duì)人骨肉瘤細(xì)胞DNA損傷修復(fù)及惡性表型的影響及分子機(jī)制。方法:
構(gòu)建靶向HELQ的慢病毒載體(Lv-shHELQ、Lv-HELQ)和陰性對(duì)照載體,分別轉(zhuǎn)染人骨肉瘤細(xì)胞系143B和U2-OS細(xì)胞,陰性慢病毒轉(zhuǎn)染為陰性對(duì)照。轉(zhuǎn)染48h后,分別運(yùn)用Transwell實(shí)驗(yàn)、劃痕實(shí)驗(yàn)、CCK8實(shí)驗(yàn)和彗星實(shí)驗(yàn)檢測(cè)人骨肉瘤細(xì)胞的侵襲、遷移、增殖能力以及細(xì)胞中DNA損傷水平。運(yùn)用熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞中HEL
2、QmRNA表達(dá)水平,WesternBlot實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞中HELQ、CHK1以及RAD51蛋白表達(dá)水平。
結(jié)果:
骨肉瘤細(xì)胞系143B和U2-OS細(xì)胞中HELQmRNA表達(dá)水平明顯低于成骨細(xì)胞,而HELQ蛋白表達(dá)水平卻明顯高于成骨細(xì)胞。與陰性對(duì)照組相比,下調(diào)HELQ的表達(dá)水平可以顯著增強(qiáng)骨肉瘤細(xì)胞的侵襲、遷移以及增殖能力,而上調(diào)HELQ的表達(dá)水平可以顯著抑制骨肉瘤細(xì)胞的侵襲、遷移以及增殖能力;上調(diào)HELQ的骨肉瘤細(xì)胞中
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