PP1α對(duì)骨肉瘤Wnt-β-catenin信號(hào)通路途徑的影響.pdf_第1頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

1、目的:探索PP1α對(duì)骨肉瘤Wnt/β-catenin信號(hào)通路途徑的影響，為進(jìn)一步研究PP1α在骨肉瘤發(fā)生、發(fā)展、凋亡過(guò)程發(fā)揮的作用提供基礎(chǔ)。
　　 方法:提取骨肉瘤U-2OS細(xì)胞總RNA，RT-PCR擴(kuò)增PP1α并克隆至pEGFP-N1真核表達(dá)載體，將重組質(zhì)粒陽(yáng)性克隆轉(zhuǎn)染U-2OS細(xì)胞經(jīng)過(guò)培養(yǎng)24到48小時(shí)后以Western blot檢測(cè)其PP1α的蛋白水平表達(dá)。通過(guò)RT-PCR 比較野生型和高表達(dá)PP1α細(xì)胞株Wnt/β-ca

2、tenin信號(hào)通路中相關(guān)分子β-catenin、c-myc、cyclinD1的表達(dá)差異，觀察PP1α對(duì)該信號(hào)通路的影響。
　　 結(jié)果:成功構(gòu)建真核表達(dá)載體pEGFP-N1-PP1α，轉(zhuǎn)染U-2OS細(xì)胞后PP1α蛋白表達(dá)水平增強(qiáng)并且PP1α高表達(dá)細(xì)胞株β-catenin信號(hào)通路中β-catenin、c-myc、cyclinD1 mRNA表達(dá)水平呈時(shí)間依賴性增強(qiáng)。
　　 結(jié)論: PP1α表達(dá)水平升高可能通過(guò)Wnt/β-cat

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