不同劑量2-甲氧基雌二醇對(duì)雌激素受體在低氧性肺動(dòng)脈高壓大鼠肺組織表達(dá)的影響.pdf

1、目的：探討在低氧性肺動(dòng)脈高壓大鼠模型中，不同劑量的2-甲氧基雌二醇（2-methoxyextradiol，2ME）對(duì)其肺組織中雌激素受體（estrogen receptor，ER）表達(dá)的影響，探索2ME對(duì)低氧性肺動(dòng)脈高壓（hypoxic pu lmonary hypertension，HPH）及肺血管重塑的作用機(jī)制。
　　方法：
　　健康雌性SD大鼠50只，按隨機(jī)數(shù)字表法平均分為5組，分別為假手術(shù)+常氧組、去勢(shì)+低氧組、去勢(shì)

2、+低氧+2ME低劑量組、去勢(shì)+低氧+2ME中劑量組、去勢(shì)+低氧+2ME高劑量組。假手術(shù)+常氧組大鼠行腹腔切開找到雙側(cè)卵巢后未進(jìn)行特殊處理直接還納縫合，將大鼠置于正常空氣環(huán)境中；去勢(shì)大鼠均行卵巢切除術(shù)，術(shù)后2ME干預(yù)組分別給予不同濃度2ME（72μmol·kg-1·d-1、240μmol·kg-1·d-1、720μmol·kg-1·d-1）皮下注射，并將大鼠置于常壓低氧箱內(nèi)飼養(yǎng)，連續(xù)飼養(yǎng)8周，以建立HPH模型。觀察大鼠一般狀況變化，應(yīng)用右

3、心導(dǎo)管法即肝素化后的聚乙烯導(dǎo)管經(jīng)頸外靜脈插管，經(jīng)上腔靜脈、右心室進(jìn)入肺動(dòng)脈，測(cè)量肺動(dòng)脈壓力，測(cè)壓后留取血標(biāo)本、肺組織、心臟，并應(yīng)用公式計(jì)算右心室肥厚指數(shù)（right ventricule hypertrophy index，RVHI），HE染色觀察肺小動(dòng)脈重塑情況。采用ELISA試劑盒檢測(cè)大鼠血清中2ME水平。采用免疫組化方法檢測(cè)ERα、ERβ、PCNA在肺組織的定位及表達(dá)情況。
　　結(jié)果：
　　1大鼠的一般狀況
　　

4、低氧環(huán)境下的大鼠逐漸出現(xiàn)活動(dòng)量減少、食水減少、體重下降、體毛晦暗易脫落、呼吸頻率加快，最終主要表現(xiàn)為安靜休息，低氧8周的大鼠無(wú)死亡。與假手術(shù)+常氧組大鼠體重（313.67±7.024）相比，去勢(shì)+低氧組（258.33±7.572）體重增長(zhǎng)速度緩慢；與去勢(shì)+低氧+2ME高劑量組（308.33±6.028）相比，去勢(shì)+低氧組大鼠體重增長(zhǎng)速度減慢，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。（見Fig.3）
　　2大鼠血流動(dòng)力學(xué)改變（mPAP）
　　與假手術(shù)+

5、常氧組大鼠的mPAP（13.23±0.85）比較，去勢(shì)+低氧組的mPAP（30.95±1.53）明顯升高；與去勢(shì)+低氧組比較，給予不同劑量2M E干預(yù)的各組大鼠mPAP（去勢(shì)+低氧+2ME高劑量組mPAP為17.44±0.84；去勢(shì)+低氧+2ME中劑量組mPAP為21.20±0.77；去勢(shì)+低氧+2ME低劑量組mPAP為22.46±1.30）均下降，且去勢(shì)+低氧+2ME高劑量組m PAP下降最明顯，2ME低、中劑量?jī)山M相比，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異

6、。（見Fig.4）
　　3大鼠肺小血管及右心室形態(tài)學(xué)變化
　　光鏡下，假手術(shù)+常氧組肺動(dòng)脈管壁細(xì)胞分布均勻連續(xù)，無(wú)水腫或壞死；而去勢(shì)+低氧組大鼠肺小動(dòng)脈管壁增厚，平滑肌細(xì)胞數(shù)目增多，管腔變窄；2ME干預(yù)組大鼠上述形態(tài)學(xué)改變相對(duì)較輕，以去勢(shì)+低氧+2ME高劑量組改變?yōu)樽钶p。（見Fig.1）
　　與假手術(shù)+常氧組大鼠RVHI（0.22±0.02）相比，低氧狀態(tài)下的RV HI均增大；與去勢(shì)+低氧組（0.31±0.01）相比，

7、2ME干預(yù)的各組大鼠R VHI均減小，但三種劑量之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。（見Fig.5）
　　4大鼠血清中2ME含量的變化
　　與假手術(shù)+常氧組大鼠血清中2ME含量（9.42±1.05）相比，去勢(shì)+低氧組血清中2ME含量（7.88±0.46）下降，給予2ME干預(yù)后血清中2 ME含量升高，且去勢(shì)+低氧+2ME高劑量組（11.37±0.64）升高最明顯。（見 Fig.6）
　　5免疫組化
　　ERα、ERβ、PCNA在肺組