孕酮降低子癇前期大鼠交感中樞氧化應(yīng)激水平的作用機(jī)制研究.pdf

1、目的:
　　妊娠期高血壓疾病的重要分類之一-子癇前期（preeclampsia，PE）是妊娠期特有的疾病，為產(chǎn)科常見(jiàn)并發(fā)癥，嚴(yán)重危害母嬰健康。但目前其病因及發(fā)病機(jī)制仍不十分明確，臨床缺乏有效的預(yù)防及治療措施。研究表明PE患者存在交感神經(jīng)活動(dòng)異?？哼M(jìn)，且它是導(dǎo)致PE患者心血管功能紊亂的重要機(jī)制之一。腦于交感中樞頭端延髓腹外側(cè)區(qū)(rostral ventrolateral medulla，RVLM)及所含的前交感神經(jīng)元在維持基礎(chǔ)血壓和

2、交感神經(jīng)活動(dòng)中起到關(guān)鍵作用。RVLM氧化應(yīng)激(oxidativestress)增強(qiáng)與高血壓等心血管疾病的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。我們前期的實(shí)驗(yàn)已經(jīng)證實(shí)，RVLM氧化應(yīng)激水平的增強(qiáng)是子癇前期大鼠交感神經(jīng)活動(dòng)亢進(jìn)和心血管功能紊亂的中樞機(jī)制之一。研究表明血漿孕激素水平的降低與PE心血管功能紊亂的發(fā)生發(fā)展關(guān)系密切，且補(bǔ)充孕激素能夠明顯改善PE患者的臨床癥狀。目前為止孕酮改善PE心血管功能這一結(jié)論仍然備受爭(zhēng)議，且其具體機(jī)制尚未明確。為進(jìn)一步探索孕酮改善

3、PE的可能機(jī)制以及為其預(yù)防及治療提供新的思路，本實(shí)驗(yàn)的主要目標(biāo)是明確孕酮對(duì)PE動(dòng)物模型上RVLM區(qū)超氧陰離子含量的作用和機(jī)制。
　　方法:
　　使用醋酸去氧皮質(zhì)酮(DOCA)腹腔注射及生理鹽水(saline)喂養(yǎng)懷孕SD大鼠構(gòu)建PE動(dòng)物模型（PDS組），同時(shí)設(shè)立Con組（nonpregnant animals）、DS組（nonprgnant animals receiving DOCA and saline）及NP組(nor

4、mal pegnantanimals)作為對(duì)照，通過(guò)監(jiān)測(cè)大鼠血壓(MAP)、心率(HR)、腎交感放電活動(dòng)(RSNA)、24小時(shí)尿蛋白含量等指標(biāo)評(píng)價(jià)模型的建立;將PDS組及NP組隨機(jī)各分出兩個(gè)亞組，予以腹腔注射孕激素（己酸羥孕酮，17-OHPC）或者芝麻油（溶劑對(duì)照，Veh），分為NP+Veh組、NP+17-OHPC組、PDS+Veh組及PDS+17-OHPC組;Elisia試劑盒檢測(cè)大鼠血清及腦脊液中孕酮含量;大鼠RVLM區(qū)DHE探針熒

5、光染色檢測(cè)超氧陰離子含量;western blot檢測(cè)氧化應(yīng)激相關(guān)蛋白NADPH氧化酶NOX4及過(guò)氧化物歧化酶SOD1的表達(dá)變化，同時(shí)檢測(cè)1型血管緊張素Ⅱ受體AT1R、核孕酮受體nPGR-A及nPGR-B的表達(dá)改變。
　　結(jié)果:
　　1.子癇前期大鼠模型的建立:與Con組、DS組及NP組相比，PDS組（子癇前期模型組）平均動(dòng)脈壓升高、心率升高、腎交感放電活動(dòng)增強(qiáng)、24小時(shí)尿蛋白含量升高(P＜0.05)。
　　2.與NP

6、組相比，PDS組血清及腦脊液中孕酮濃度均明顯降低(p＜0.05)。使用孕激素（己酸羥孕酮，17-OHPC）3.32 mg/kg計(jì)量單次腹腔注射(PDS+17-OHPC)3天后，二者濃度均明顯升高(p＜0.05)。
　　3.孕激素處理3天后，子癇前期大鼠心血管指標(biāo)明顯下降:與PDS+Veh組相比，PDS+17-OHPC組的平均動(dòng)脈壓、腎交感放電活動(dòng)及24小時(shí)尿蛋白含量均明顯降低(P＜0.05)。
　　4.使用DHE探針熒光染色

7、法檢測(cè)RVLM超氧陰離子含量，結(jié)果表明PDS組RVLM平均熒光密度統(tǒng)計(jì)值明顯增強(qiáng)(P＜0.05)，而孕激素處理后超氧陰離子含量降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　5.子癇前期模型組RVLM區(qū)氧化應(yīng)激相關(guān)蛋白AT1R和NOX4表達(dá)上調(diào)(P＜0.05)，孕激素處理后二者均明顯下調(diào)(P＜0.05);子癇前期模型組RVLM核孕酮受體nPGR-B表達(dá)明顯增多(P＜0.05)，孕激素處理后其表達(dá)下調(diào)(P＜0.05)。
　　結(jié)論