抗心律失常肽與尼非卡蘭對(duì)兔急性心肌缺血室性心律失常及縫隙連接的影響.pdf

1、第一部分：抗心律失常肽與尼非卡蘭對(duì)兔急性心肌缺血室性心律失常及復(fù)極離散度的影響
　　研究背景：
　　近年來(lái)，心臟性猝死在國(guó)內(nèi)外成人猝死的死因中均占首位。心臟性猝死主要由急性心肌缺血引起，其病理生理機(jī)制最常見(jiàn)為室性快速性心律失常（室顫和室速）導(dǎo)致的心臟驟停。急性心肌缺血時(shí)縫隙連接脫耦聯(lián)導(dǎo)致傳導(dǎo)速度減慢，形成微折返環(huán)引起室性心律失常。
　　目的：
　　建立兔左室心肌塊的灌注心律失常模型，監(jiān)測(cè)縫隙連接激動(dòng)劑抗心律失常肽

2、(AAP10)、新型Ⅲ類抗心律失常藥物尼非卡蘭對(duì)急性心肌梗死室性心律失常發(fā)生率及心室肌細(xì)胞復(fù)極離散度的影響。
　　方法：
　　隨機(jī)將60只日本長(zhǎng)耳白兔分為5組，每組12只。正常對(duì)照組灌流正常臺(tái)氏液，急性心肌缺血組穩(wěn)定后停灌30分鐘，AAP10低濃度組灌流 AAP10（100nmol/L）+臺(tái)氏液后停灌30分鐘，AAP10高濃度組灌流1000nmol/L AAP10+臺(tái)氏液后停灌30分鐘，尼非卡蘭組灌流尼非卡蘭+臺(tái)氏液后停灌3

3、0分鐘。記錄左室心肌塊容積心電圖和心內(nèi)膜、心外膜的跨膜動(dòng)作電位，測(cè)量QT間期、T波波峰到T波終末間期（Tp-e）、心外膜及心內(nèi)膜刺激反應(yīng)間期(Stimulus response interval，SRI)、有效不應(yīng)期（ERP），統(tǒng)計(jì)室性心動(dòng)過(guò)速(VT)的發(fā)生率。
　　結(jié)果：
　?、俑鹘M基線資料無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）。
　?、谡?duì)照組、急性心肌缺血組、AAP10低濃度組、AAP10高濃度組、尼非卡蘭組 VT的誘發(fā)

4、率分別為0％(0/12)、100%(12/12)、42%(5/12)、17%(2/12)和25%(3/12)。急性心肌缺血組與 AAP10組、尼非卡蘭組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05）。
　?、跘AP10低、高濃度組與急性心肌缺血組相比，SRI顯著縮短（P<0.05）。
　　④不同濃度AAP10均不影響心外膜和心內(nèi)膜的動(dòng)作電位形態(tài)和時(shí)程，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。尼非卡蘭延長(zhǎng)心內(nèi)膜及心外膜動(dòng)作電位時(shí)程（P<0.01）

5、。
　　⑤各組對(duì)QT及復(fù)極離散度的影響：急性心肌缺血組較正常對(duì)照組ERP無(wú)明顯改變(P>0.05)，QT、Tp-e、Tp-e/QT增加（P<0.05）。AAP10各組較正常對(duì)照組、Tp-e、Tp-e/QT，無(wú)明顯改變。尼非卡蘭組QT延長(zhǎng)，ERP延長(zhǎng)，Tp-e未延長(zhǎng)，Tp-e/QT縮?。≒<0.01）
　　結(jié)論：
　　抗心律失常肽(AAP10)可以在不影響動(dòng)作電位形態(tài)和時(shí)程的前提下縮短SRI，逆轉(zhuǎn)急性心肌缺血時(shí)縫隙連接的

6、傳導(dǎo)速度減慢，尼非卡蘭可延長(zhǎng)ERP、不增加心室肌復(fù)極離散度，兔急性心肌缺血室性心律失常的發(fā)生率明顯降低。
　　第二部分：抗心律失常肽與尼非卡蘭對(duì)兔急性心肌缺血縫隙連接的影響
　　研究背景：
　　急性心肌缺血時(shí)縫隙連接脫耦聯(lián)導(dǎo)致心臟電傳導(dǎo)速度明顯降低，心肌細(xì)胞間形成微折返環(huán)引起室性心律失常。急性心肌梗死時(shí)Cx43重構(gòu)導(dǎo)致縫隙連接失耦聯(lián)導(dǎo)致心室肌細(xì)胞間電傳導(dǎo)不均一，容易形成折返是急性心肌梗死時(shí)室性心律失常發(fā)生機(jī)制之一?？剐?/p>

7、律失常肽為縫隙連接激動(dòng)劑，尼非卡蘭為新型Ⅲ類抗心律失常藥物，他們是否通過(guò)改善縫隙連接重構(gòu)達(dá)到抗心律失常作用尚不清楚。
　　目的：
　　觀察縫隙連接激動(dòng)劑抗心律失常肽(AAP10)與尼非卡蘭對(duì)兔急性心肌缺血時(shí)縫隙連接蛋白43磷酸化水平的影響，并探討其作用機(jī)制。
　　方法：
　　兔左心室楔形心肌塊模型隨機(jī)分為5組：正常對(duì)照組、急性心肌缺血組、AAP10低濃度（100nmol/L）組、AAP10高濃度（1000nmol

8、/L）組、尼非卡蘭組，每組12只。通過(guò)SDS-PAGE電泳，Wstern-blot檢測(cè)CX43含量及去磷酸化水平的改變。
　　結(jié)果：
　?、僬＝MTotal-Cx43和NP-Cx43蛋白均有表達(dá)。
　?、谕眯募〖毙匀毖獣r(shí)與正常組相比，缺氧30min組Total-Cx43蛋白表達(dá)下降（P<0.01），NP-Cx43蛋白表達(dá)增加（P<0.05），說(shuō)明缺氧組p-Cx43蛋白水平降低，心肌縫隙連接重構(gòu)明顯。
　?、?AA

9、P10干預(yù)各組、尼非卡蘭組，Total-Cx43蛋白表達(dá)又有所回升（與急性心肌缺血組相比P<0.01），且NP-Cx43蛋白表達(dá)較缺血組下降（P<0.05）。說(shuō)明AAP10、尼非卡蘭干預(yù)后，增加了p-Cx43蛋白水平，可改善心肌縫隙連接重構(gòu)。
　?、懿煌瑵舛華AP10干預(yù)組，隨著AAP10濃度增加，其Total-Cx43蛋白表達(dá)相應(yīng)增加（P<0.05），且NP-Cx43蛋白表達(dá)相應(yīng)下降（P<0.01）。說(shuō)明心肌縫隙連接重構(gòu)改善與A

10、AP10濃度水平正相關(guān)。
　?、萑毖?5min、30min、40min時(shí)Total-Cx43蛋白表達(dá)逐漸下降（P<0.01），而NP-Cx43蛋白表達(dá)逐漸增加（P<0.05），說(shuō)明隨著缺血時(shí)間的推移Total-Cx43表達(dá)逐漸下降，與其同時(shí) p-Cx43蛋白表達(dá)也減少，心肌縫隙連接重構(gòu)隨著缺血時(shí)間加重。
　　結(jié)論：
　　急性心肌缺血組總Cx43蛋白表達(dá)下降，而去磷酸化的Cx43（NP-Cx43）蛋白表達(dá)增加，心肌 CX