山藥素類化合物的定量分析方法研究.pdf

1、山藥素為山藥的內(nèi)源性植物激素，由Hashimoto于1972年首次由山藥零余子中分離得到，并證實(shí)該類物質(zhì)是控制山藥休眠的重要因素之一。隨后發(fā)現(xiàn)該類物質(zhì)也廣泛存在于薯蕷屬的不同植物中。藥理學(xué)研究證實(shí)山藥素物質(zhì)具有多種有益的生物活性，如抗炎、抗氧化及解痙攣等作用。
　　為了更深入和廣泛對(duì)山藥素類物質(zhì)的植物激素和生物活性進(jìn)行探究，我們擬建立行之有效的測(cè)定方法以便于對(duì)山藥中的山藥素的含量進(jìn)行有效的檢測(cè)，但目前對(duì)山藥素含量進(jìn)行準(zhǔn)確和快速分析

2、測(cè)定的報(bào)道較少?；诖?，本文提出以高效液相和定量核磁方法來對(duì)山藥素進(jìn)行含量測(cè)定的技術(shù)路線，主要研究?jī)?nèi)容及結(jié)果如下：
　　1.山藥素Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ對(duì)照品的合成
　　在本章中，我們選擇用 Wittig-hornor反應(yīng)構(gòu)建山藥素的分子骨架。首先對(duì)3,5-二羥基苯甲酸及其衍生物進(jìn)行酯化對(duì)其羧基進(jìn)行保護(hù)，隨后通過甲基化及芐基化，對(duì)酚羥基選擇性地進(jìn)行保護(hù)并用四氫鋁鋰將酯還原為醇并用三溴化磷進(jìn)行溴代，之后經(jīng)Wittig-hornor及鈀

3、碳還原反應(yīng)制得山藥素Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ對(duì)照品。山藥素Ⅰ則是將由Wittig-hornor反應(yīng)得到的均苯二烯前體由碘催化關(guān)環(huán)得到。化合物的結(jié)構(gòu)由紅外、核磁氫譜及碳譜等分析手段進(jìn)行了表征和驗(yàn)證。
　　2.高效液相色譜法測(cè)定山藥素的含量
　　建立了同時(shí)測(cè)定9種山藥素及其衍生物的高效液相分析方法。實(shí)驗(yàn)條件為：色譜柱為Cosmosil5C18-PAQ色譜柱，流動(dòng)相為甲醇-水體系，比例為52:48；流速1.0 mL min-1，檢測(cè)波長(zhǎng)選為21

4、0 nm。山藥素及其衍生物的檢出限和定量限分別為0.217-1.56 g/mL和0.651-4.70 g/mL。隨后利用該方法對(duì)山藥皮和山藥零余子中不同山藥素的含量進(jìn)行了測(cè)定，其回收率在85.5-104.7％之間。通過重復(fù)性加標(biāo)回收率等方法學(xué)驗(yàn)證表明該方法具有靈敏度好、重現(xiàn)性好等特點(diǎn)，且可用于實(shí)際樣品中山藥素含量的測(cè)定。
　　3.定量核磁法測(cè)定山藥素的含量
　　利用定量核磁(qNMR)技術(shù)中核質(zhì)子信號(hào)強(qiáng)度與數(shù)目成正比，與化學(xué)

5、性質(zhì)無關(guān)等特性，建立了無需標(biāo)準(zhǔn)品即能對(duì)山藥素含量直接進(jìn)行檢測(cè)的分析方法。實(shí)驗(yàn)中考察了不同氘代溶劑和多種內(nèi)標(biāo)物對(duì)該方法的適用性，最終以氘代丙酮作為測(cè)定時(shí)核磁氘代溶劑，1,3,5-三氧六環(huán)作為內(nèi)標(biāo)物，在此基礎(chǔ)進(jìn)行了山藥皮中山藥素Ⅰ含量的測(cè)定，此外，我們?cè)谏剿幤ご痔嵛镏幸矙z測(cè)到了山藥素Ⅰ構(gòu)體（2,4-二甲氧基-6,7-二羥基菲）的存在，并通過加標(biāo)法對(duì)其進(jìn)行了確認(rèn)，隨后對(duì)其含量進(jìn)行了測(cè)定。最后通過精密度實(shí)驗(yàn)、重復(fù)性實(shí)驗(yàn)及加標(biāo)回收率實(shí)驗(yàn)對(duì)該方法進(jìn)