卡維地洛對TLR4信號通路介導的H9C2心肌細胞凋亡的影響.pdf

1、目的:
　　探討卡維地洛對TLR4信號通路介導的H9C2心肌細胞凋亡的影響,以及卡維地洛對TLR4、核轉錄因子κB(NF-κB)、β-抑制蛋白2(β-arrestin2)蛋白表達的影響,以探討卡維地洛抗細胞凋亡的分子機制。
　　方法:
　　采用卡維地洛(1 um、5 um、10 umol/L)、NF-κB抑制劑PDTC(100 umol/L)、TLR4封閉抗體(20 ug/mL)預孵育H9C2心肌細胞1 h后,應用無血

2、清1640作用24 h。實驗分為7組:正常對照組(Control組),血清剝奪組(SD組),小劑量組卡維地洛組(Car1卡維地洛1 umol/L),中劑量組卡維地洛組(Car5卡維地洛5 umol/L),高劑量組卡維地洛組(Car10卡維地洛10 umol/L),TLR4封閉抗體組(TLR4-Ab組 TLR4封閉抗體20 ug/mL),NF-κB抑制劑PDTC組(PDTC組PDTC100 umol/L)。通過Annexin-V-FITC

3、-PI雙染方法檢測細胞凋亡,應用蛋白質印跡技術檢測TLR4、核蛋白NF-κB、β-arrestin2蛋白的表達。
　　結果:
　　(1)正常組發(fā)現(xiàn)少量凋亡 H9C2心肌細胞,血清剝奪組細胞凋亡明顯升高(p<0.05);NF-κB阻斷劑PDTC預處理能明顯減少細胞凋亡(p<0.05);TLR4封閉抗體預處理能明顯減少細胞凋亡(p<0.05);不同劑量卡維地洛預處理組能明顯減少細胞凋亡(p<0.05)。
　　(2)與正常組

4、比較,血清剝奪組 TLR4蛋白表達顯著增加(p<0.05);NF-κB阻斷劑 PDTC預處理和高劑量卡維地洛預處理能顯著減低血清剝奪后TLR4蛋白的增加(p<0.05)。
　　(3)與正常組比較,血清剝奪組NF-κB蛋白表達顯著增加(p<0.05);TLR4封閉抗體預處理和高劑量卡維地洛預處理能顯著減低血清剝奪后 NF-κB蛋白的增加(p<0.05)。
　　(4)與正常組比較,血清剝奪組β-arrestin2蛋白表達減少(p