Sonic Hedgehog通過microRNA92a轉錄后調控KLF4在內皮功能中的作用機制研究.pdf

1、Shh（Sonic hedgehog）信號通路作用于動脈粥樣硬化病變。有研究表明microRNA-92a對于維持內皮功能有重要作用。在人髓母細胞瘤中，Shh被證實可以調控microRNA-92a的表達。在內皮細胞中， Shh信號通路是否能夠調節(jié)內皮功能仍未見報道。本研究的目的是探討Shh信號通路在調節(jié)內皮細胞功能中的作用機制。
　　方法與結果:在人臍靜脈內皮細胞（ human umbilical vein endothelial

2、cells， HUVECs)中，過表達 Shh信號通路可以上調microRNA-92a的表達水平,下調KLF4（krüppel-like factor-4）的表達水平。反之，敲低Shh信號通路可以使microRNA-92a的表達水平下降和KLF4的表達水平升高，說明了Shh信號通路可以調控KLF4的表達。計算機軟件預測到在KLF4的3’端非編碼區(qū)（3’-untranslated region,3’UTR）存在兩個高度保守的microRN

3、A-92a的結合位點。我們應用熒光素酶報告基因證實了在microRNA-92a上存在與KLF4的3’端非編碼區(qū)序列結合的特殊結合位點。下調microRNA-92a可以使KLF4，內皮型一氧化氮合酶（eNOS）以及血栓彈力蛋白在蛋白及mRNA水平的表達均升高。另外，我們把 Shh-cDNA和 anti-miR-92a共轉染到HUVEC中，與只轉染Shh-cDNA的細胞相比，KLF4的蛋白表達水平恢復到正常HUVECs中KLF4的表達水平。