T細胞中過表達Akt抵抗腫瘤免疫抑制和增強抗腫瘤活性小鼠CT26腫瘤模型中多周期氟尿嘧啶化療損傷細胞毒性T細胞抗腫瘤功能.pdf

1、目的：
　　腫瘤在其形成中產(chǎn)生了獨特的微環(huán)境，具有異質(zhì)性，結構復雜，能分泌刺激性生長因子和細胞因子，募集不同類型的細胞，通過多種機制抑制免疫應答，逃避免疫監(jiān)視和免疫系統(tǒng)的攻擊。復雜的炎癥和免疫抑制環(huán)境會大大影響腫瘤反應性T細胞活性，回輸?shù)腡細胞也會被腫瘤微環(huán)境所抑制，降低治療的有效性。針對某一種抑制策略的療法通常不能廣泛和長期有效，我們通過增強回輸?shù)腡細胞活性，使之能夠抵抗腫瘤中已知和未知的免疫抑制因子，可能會是一種有效的方法。對

2、T細胞的信號通路進行分析，發(fā)現(xiàn)絲氨酸/蘇氨酸蛋白酶Akt（蛋白激酶B，PKB）在T細胞發(fā)揮效應功能中處于信號中樞節(jié)點，通過調(diào)節(jié)Akt來提高T細胞抗腫瘤活性有顯著的研究意義。
　　方法：
　　我們在表達卵清蛋白(OVA)抗原的黑色素瘤(B16-OVA)模型中，檢測腫瘤微環(huán)境里T細胞的Akt磷酸化水平，然后通過逆轉錄病毒轉導Akt至特異性靶向OVA的OT-1小鼠的T細胞中，檢測轉導Akt后OT-1細胞的體內(nèi)外抗腫瘤活性。在人前列

3、腺癌PC3M模型中，我們構建了聯(lián)合表達靶向上皮細胞粘附分子(EpCAM)的嵌合抗原受體(CAR)和Akt的逆轉錄病毒載體，轉導至人外周血細胞，檢測過表達Akt的腫瘤特異性T細胞的體內(nèi)外抗腫瘤活性。
　　結果：
　　腫瘤微環(huán)境中T細胞的Akt磷酸化水平是受抑制的，OT-1過表達Akt后在B16-OVA細胞的刺激下分泌的IFN-γ增多且增殖能力增強?；剌斶^表達Akt的OT-1細胞治療B16-OVA腫瘤，其抑制腫瘤的生長能力更強且

4、延長了小鼠的生存期。PC3M細胞也表現(xiàn)多種免疫抑制表型，相比靶向P3CM表面抗原EpCAM的CAR-T細胞，過表達Akt的CAR-T細胞在PC3M微環(huán)境中增殖受到的抑制最少，凋亡水平降低，體外殺傷能力提高;回輸過表達Akt的CAR-T細胞治療免疫缺陷的NOD/SCID荷瘤小鼠時，對PC3M腫瘤生長的抑制能力更強。
　　結論：
　　腫瘤特異性T細胞中過表達Akt能幫助其抵抗腫瘤微環(huán)境對T細胞活性的抑制，增強腫瘤微環(huán)境中T細胞的