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文檔簡介
1、目的:研究紫花牡荊素(casticin,CAS)抑制人小細胞肺癌NCI-H446細胞系干樣細胞(Lung cancer stem-like cells,LCSLCs)侵襲和逆轉(zhuǎn)上皮間充質(zhì)轉(zhuǎn)化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)表型作用。
方法:體外培養(yǎng)人肺癌NCI-H446細胞系,采用干細胞條件培養(yǎng)基懸浮培養(yǎng)法富集并得到LCSLCs,并通過藻紅蛋白(PE)熒光標記CD133流式細胞術(shù)(
2、FCM)檢測CD133+細胞百分率;Transwell法比較LCSLCs與親本細胞(Parental cells,PCs)侵襲和遷移能力。Transwell法測定CAS對LCSLCs侵襲、遷移能力的抑制作用;Western blot分析CAS對LCSLCs E-cadherin、N-cadherin、Twist蛋白和Snail蛋白表達的影響。
結(jié)果:1.在干細胞條件培養(yǎng)基中LCSLCs懸浮生長呈現(xiàn)典型非粘附三維球體狀,并高表達
3、 CD133蛋白(P≤0.05)。2.與人肺癌NCI-H446細胞系細胞相比,LCSLCs具有更強的體外侵襲和遷移能力(P≤0.05)。3.CAS能顯著抑制 LCSLCs的體外侵襲和遷移能力(P≤0.05)。4.CAS能顯著上調(diào)LCSLCs E-cadherin的表達(P≤0.05),并顯著下調(diào)N-cadherin、Twist蛋白和Snail蛋白的表達(P≤0.05)。
結(jié)論:1.與小細胞肺癌NCI-H446細胞系細胞相比,L
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