喹諾酮類抗菌藥吉米沙星的PK-PD及新型抗結核藥物的ADME-T早期研究.pdf

1、感染性疾病是威脅人類生命健康和社會穩(wěn)定的重大疾病，耐藥菌感染已經(jīng)成為臨床抗感染治療的嚴重問題，細菌耐藥是抗感染藥物研發(fā)面臨的最大科學挑戰(zhàn)。臨床常見的耐藥菌主要包括耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)、耐甲氧西林表皮葡萄球菌(MRSE)、耐青霉素肺炎鏈球菌(PRSP)、耐萬古霉素腸球菌（VRE）、多重耐藥銅綠假單胞菌(MDR-PA)、泛耐藥鮑曼不動桿菌(PDR-AB)等。其中，MRSA感染發(fā)病率高、死亡率高，已成為院內(nèi)感染的重要致病菌之一

2、，與乙型肝炎、艾滋病并稱為世界三大最難解決的感染性疾病。
　　抗生素的不合理使用和濫用是導致細菌耐藥問題日益嚴重的重要因素，抗生素的作用靶位不是機體，而是機體內(nèi)外來的病原菌，藥效主要反映的是藥物對病原菌的殺滅或抑制作用，療效取決于抗生素、細菌和機體三者相互作用的結果?？股厮幋鷦恿W/藥效學(PK/PD)研究可明確闡明藥物進入機體后在感染病灶內(nèi)達到的殺菌或抑菌效果的動態(tài)過程，闡明其殺菌模式，確定描述治療效果的最佳PK/PD參數(shù)和達

3、到療效的相應PK/PD靶值，準確地用于預測藥物在人體內(nèi)的殺菌或抑菌效果，有助于制定有效合理的抗菌治療方案，為臨床研究提供重要理論依據(jù)。美國FDA和中國CFDA明確提出在藥物批準用于新適應癥前需要提供PK/PD模型和靶組織藥物濃度。
　　吉米沙星為新一代喹諾酮類抗菌藥，抗菌譜廣，抗菌活性強，尤其是對革蘭氏陽性菌的活性顯著優(yōu)于其他喹諾酮類。本文旨在研究注射用甲磺酸吉米沙星的體內(nèi)、外藥效學，并基于微透析采樣技術(MD)和液相色譜-串聯(lián)質(zhì)

4、譜(LC-MS/MS)技術測定吉米沙星在大鼠感染模型中的血漿藥物濃度、腿部藥物濃度及PK參數(shù)，分析吉米沙星PK/PD特點。
　　藥效學研究結果表明，吉米沙星具有廣譜抗菌活性，對多數(shù)受試革蘭陽性菌和革蘭陰性菌具有較強的抗菌作用，對革蘭陽性菌的體外抗菌活性大多優(yōu)于莫西沙星、環(huán)丙沙星、左氧氟沙星、克拉霉素、頭孢呋辛、氨芐西林和美羅培南，對革蘭陰性菌的體外抗菌活性大多與莫西沙星和左氧氟沙星相近或稍強，弱于環(huán)丙沙星、美羅培南，明顯優(yōu)于克拉霉

5、素、頭孢呋辛和氨芐西林。吉米沙星對金葡菌、肺炎鏈球菌、化膿鏈球菌、大腸埃希菌、肺炎克雷伯桿菌感染小鼠均有較好體內(nèi)抗菌活性，對革蘭陽性菌中金葡菌、肺炎鏈球菌、化膿鏈球菌感染小鼠的體內(nèi)療效明顯優(yōu)于莫西沙星、左氧氟沙星、環(huán)丙沙星，對革蘭陰性菌中大腸埃希菌、肺炎克雷伯桿菌感染小鼠的體內(nèi)療效，總體上優(yōu)于莫西沙星，與左氧氟沙星、環(huán)丙沙星相近。
　　感染大鼠PK研究結果表明，吉米沙星透析液的定量分析方法和微透析采樣方法經(jīng)方法學確證，可用于吉米沙

6、星的PK研究。測定了大鼠感染模型中單劑量尾靜脈分別給予9 mg/kg、18 mg/kg和72 mg/kg吉米沙星后的游離血藥濃度和腿部肌肉組織游離藥物濃度，并對PK參數(shù)進行了評價，3個劑量的血漿AUC0-24h分別為3090.96±979.81、7939.30±2157.81和32930±12880.48 h*ng/mL，Cmax分別為1583.37±573.78、4866.83±738.09和13966.68±3883.80 ng/m

7、L，T1/2分別為2.15±0.74、2.40±0.41和2.61±0.95 h;腿部AUC0-24h分別為1402.82±877.71、5005.21±3115.87和27588.99±12750.61 h*ng/mL，Cmax分別為462.77±353.47、1905.66±978.54和6046.72±2635.94 ng/mL，T1/2分別為2.25±0.67、2.79±0.47和3.78±1.80 h。
　　大鼠腿部感染

8、PK/PD研究結果表明，成功建立了MRSA感染大鼠模型，在分別單劑量尾靜脈給予吉米沙星9mg/kg、18mg/kg和72mg/kg后，血漿fAUC0-24h/MIC分別為98.91、254.06和1053.76 h*ng/mL，fCmax/MIC分別為50.67、155.74和446.93 ng/mL，f％T＞ MIC分別為0.44、0.50和1;腿部fAUC0-24h/MIC分別為44.89、160.17和882.85 h*ng/mL

9、，fCmax/MIC分別為14.80、60.98和193.50 ng/mL，f％T＞MIC分別為0.36、0.58和0.77。對PK/PD參數(shù)fAUC0-24h/MIC、fCmax/MIC和fT＞MIC與藥效學指標的相關性進行了研究，結果顯示PK/PD參數(shù)fAUC0-24h/MIC和藥效指標相關性最好(r2=0.9939)，提示吉米沙星為濃度依賴型殺菌模式。根據(jù)數(shù)據(jù)分析結果，給藥后24h時腿部菌落計數(shù)與對照組相比降低3個Log值時，推測

10、血漿的fAUC0-24h/MIC和fCmax/MIC的靶值分別為215.83和130.55，腿部肌肉組織的fAUC0-24h/MIC靶值為128.44。
　　綜上所述，吉米沙星具有廣譜抗菌活性，對革蘭氏陽性菌活性大多優(yōu)于對照藥;利用微透析采樣技術和LC-MS/MS分析方法測定了大鼠血漿和腿部藥物濃度，實現(xiàn)了同時獲取同一個體血漿和組織藥物動態(tài)變化的信息，并對其PK特征進行了評價;對感染大鼠的PK/PD研究結果顯示吉米沙星為濃度依賴型

11、殺菌模式，給藥后24h時腿部菌落計數(shù)與對照組相比降低3個Log值時，推測血漿的fAUC0-24h/MIC和fCmax/MIC的靶值分別為215.83和130.55，腿部肌肉組織的fAUC0-24h/MIC靶值為128.44。以上數(shù)據(jù)為臨床使用吉米沙星提供了理論依據(jù)。
　　結核病是嚴重危害人類健康的呼吸道傳染疾病，屬于我國法定的重大傳染病。世界衛(wèi)生組織估計，目前我國結核病年發(fā)病人數(shù)位居全球第二位。自世紀八十年代，耐藥結核病發(fā)病率不斷

12、上升，結核病與HIV/AIDS并發(fā)導致的結核疫情也再度上升，結核病成為全球重大公共衛(wèi)生問題和社會問題。但是，近40余年來幾乎沒有新作用機制的抗TB藥物問世。
　　A2和A6是我所研發(fā)的新型抗結核化合物，具有良好的發(fā)展前景。本文目的是研究A2和A6在大鼠體內(nèi)的藥動學參數(shù)，并對其毒性進行初步評價。
　　首先，本文建立并確證了A2和A6生物樣本的定量分析方法，方法確證結果顯示，該方法的回收率穩(wěn)定，線性、精密度、準確度均達到了有關技

13、術規(guī)范的要求。
　　然后，研究了大鼠經(jīng)灌胃分別給予單劑量25mg/kg的A2和A6后的藥動學參數(shù)，A2和A6半衰期較短，分別為0.43±0.09 h和1.120±0.38 h;AUC0-24h分別為452.65±254.34和214.46±89.20。A2和A6在給藥6小時以后血藥濃度已低于LLOQ。
　　毒性研究實驗顯示，靜脈給予A2和A6后，在100mg/kg劑量下，小鼠無明顯毒副反應，也未有死亡情況發(fā)生，在此劑量以下這