硫丹誘導miR-22表達變化與HUVEC-C細胞損傷的關(guān)聯(lián)研究.pdf

1、硫丹，是一種有機氯農(nóng)藥，被廣泛應(yīng)用于農(nóng)業(yè)，并在2011年被斯德哥爾摩公約列入禁用的持久性有機污染物，具有持久性、高毒性和生物富集特征，與人類疾病尤其是心血管疾病的發(fā)生發(fā)展相關(guān)，對人類的健康構(gòu)成了潛在的威脅。其生物毒性考慮與硫丹對細胞的直接損傷和對細胞功能的影響密不可分。已有研究顯示硫丹具有多種細胞毒性，但其對內(nèi)皮細胞的毒性研究尚未見報道。
　　本研究著重探討了不同劑量硫丹對人臍靜脈內(nèi)皮細胞(HUVEC-C)的毒性劑量效應(yīng)關(guān)系;從分

2、子水平和蛋白質(zhì)水平分析了參與調(diào)控細胞周期阻滯和細胞凋亡的通路，炎癥因子的變化及轉(zhuǎn)錄后調(diào)控因子miR-22的作用機制。結(jié)果表明，硫丹能夠引起血管內(nèi)皮細胞毒性，表現(xiàn)為細胞存活率降低，從20μM開始出現(xiàn)極顯著的細胞增殖抑制作用（P＜0.01），并具有劑量依賴性。硫丹在高劑量下(60μM)通過CDK6/pRb通路誘導細胞周期阻滯在G1期，在較高劑量下(40μM和60μM)通過線粒體凋亡通路誘導細胞凋亡，并且促發(fā)炎癥因子IL-6的分泌及上調(diào)IL-

3、6，IL-8的基因表達，提示硫丹暴露能夠造成血管內(nèi)皮細胞功能失調(diào)。此外，硫丹特異性地誘導miR-22的表達上調(diào)，具有時間和劑量依賴性關(guān)系。通過轉(zhuǎn)染實驗證實miR-22過表達導致細胞凋亡并使得炎癥因子IL-8的相對mRNA表達水平升高，但與細胞周期的阻滯無關(guān)，提示miR-22可能參與調(diào)控硫丹誘導的HUVEC-C細胞的凋亡和炎癥反應(yīng)過程。
　　本研究明確了硫丹具有內(nèi)皮細胞毒性，能夠?qū)е聝?nèi)皮細胞功能失調(diào)，闡明了硫丹引起人內(nèi)皮細胞功能失調(diào)