刀額新對(duì)蝦主要致敏原的分離純化與鑒定.pdf

1、食物過(guò)敏作為一類食源性疾病已引起了人們的普遍關(guān)注。過(guò)敏性疾病已被世界衛(wèi)生組織列為二十一世紀(jì)重點(diǎn)防沫的三大類疾病之一，是當(dāng)前世界性的重大衛(wèi)生學(xué)問(wèn)題。食物過(guò)敏作為一類常見(jiàn)的過(guò)敏性疾病，引起的臨床癥狀主要有頭暈、頭痛、胸悶、惡心、嘔吐、皮膚痙癢等，嚴(yán)重時(shí)還會(huì)休克甚至死亡。因此，開(kāi)展食物(特別是海產(chǎn)品)的過(guò)敏原研究對(duì)保護(hù)人們生命健康，提高人民生活質(zhì)量具有巨大的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益。 蝦蟹等甲殼類動(dòng)物及其制品是人類優(yōu)質(zhì)動(dòng)物蛋白的來(lái)源之一，也

2、是八大類容易引起過(guò)敏的食物之一。隨著國(guó)際貿(mào)易的發(fā)展，其在食品中的應(yīng)用越來(lái)越廣泛，食用蝦引起過(guò)敏的潛在危害更值得重視。本論文選用我國(guó)華南地區(qū)常見(jiàn)的食用蝦種，刀額新對(duì)蝦(Metapenaeusensis俗名基圍蝦)，作為研究對(duì)象，主要從蝦過(guò)敏原蛋白的分離純化、純化產(chǎn)物的免疫學(xué)鑒定等方面進(jìn)行研究，得到如下結(jié)論： 首先，應(yīng)用SDS-PAGE技術(shù)對(duì)粗提蛋白液進(jìn)行初步分離，SDS-PAGE圖譜顯示刀額新對(duì)蝦粗提蛋白約有20條可辨蛋白帶，分子

3、量在12.1KDa～105.6KDa之間。利用12例蝦過(guò)敏患者血清通過(guò)免疫印跡(western-blotting)分析，初步鑒定出刀額新對(duì)蝦粗提液中有7條過(guò)敏蛋白條帶，其分子量分別為36KDa、46.2KDa、60KDa、64.8KDa、68KDa、78KDa和88.5KDa。另外還有21.6KDa的蛋白也被個(gè)別患者的血清識(shí)別，其中4條過(guò)敏蛋白條帶反應(yīng)率高，為主要致敏組分，分子量分別是36KDa、46.2KDa、60KDa和68KDa，

4、這與國(guó)內(nèi)外其他人的研究結(jié)果有一定差異，這可能與蝦的種類不同、各地區(qū)蝦類生長(zhǎng)環(huán)境的不一致性以及過(guò)敏患者人群的個(gè)體差異有關(guān)。 其次，通過(guò)硫酸銨分段鹽析、DEAE-52離子交換層析和SephadexG-100凝膠柱層析等方法逐步純化了蝦過(guò)敏蛋白。并通過(guò)免疫印跡(western-blotting)、斑點(diǎn)酶聯(lián)免疫(dot-ELISA)、和酶聯(lián)免疫(ELISA)間接法對(duì)已經(jīng)純化的蝦過(guò)敏蛋白進(jìn)行了分析和鑒定。具有很高的反應(yīng)性。 本研究