白細(xì)胞介素8在肺腺癌中的異常表達(dá)及其臨床意義.pdf

1、目的：非小細(xì)胞肺癌(Non-Small-Cell Lung Cancer， NSCLC)是人類主要的惡性腫瘤之一，具有較高的侵襲性和較差的預(yù)后。近年來，由于大氣污染等環(huán)境因素造成了肺腺癌的發(fā)病呈現(xiàn)逐年上升的趨勢。炎癥與包括肺癌在內(nèi)的多種惡性腫瘤發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，然而其具體機(jī)制尚不清楚。進(jìn)一步解析肺癌浸潤炎癥細(xì)胞及其分泌因子在腫瘤進(jìn)展中的作用，能夠為靶向干預(yù)腫瘤相關(guān)炎癥免疫失衡提供科學(xué)依據(jù)。白細(xì)胞介素8(Interleukin-8，IL-

2、8)在肺癌的發(fā)生、發(fā)展中的作用越來越引起人們的關(guān)注，但有關(guān)白細(xì)胞介素8在肺腺癌方面的研究文獻(xiàn)上報導(dǎo)極少。本研究通過檢測白細(xì)胞介素8在肺腺癌組織中的表達(dá)，結(jié)合其臨床病例資料，分析白細(xì)胞介素8的表達(dá)與肺腺癌的腫塊大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期的相關(guān)性，并進(jìn)一步探討其臨床意義。
　　方法：隨機(jī)選取58例經(jīng)病理證實為肺腺癌的患者為研究對象，取其新鮮癌腫組織為研究組，取癌旁組織為對照組。其中N0有35例，N1有8例，N2有15例。TNM分期中

3、Ⅰ期26例，Ⅱ期13例，Ⅲ期19例。所有新鮮組織取材后經(jīng)4％多聚甲醛液體浸泡保存后集中進(jìn)行石蠟包埋，每個標(biāo)本均按照0.4μm的厚度制作若干石蠟切片，然后分別進(jìn)行如下實驗。①HE染色，并觀察其鏡下特征。②通過反轉(zhuǎn)錄酶-聚合酶鏈鎖反應(yīng)(RT-PCR)檢測IL-8 mRNA在肺腺癌的癌組織及癌旁組織中的基因水平差異。③通過免疫組化染色檢測58例肺腺癌的癌組織及癌旁肺組織中IL-8表達(dá)。④用免疫熒光染色方法檢測58例肺腺癌的癌組織及癌旁肺組織中

4、IL-8表達(dá)。⑤通過酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)實驗檢測58例肺腺癌的癌組織及癌旁肺組織中IL-8異常表達(dá)。⑥通過流式細(xì)胞儀檢測肺癌組織IL-8的細(xì)胞來源。⑦結(jié)合其臨床病理特征，分析白細(xì)胞介素8的表達(dá)與肺腺癌的腫塊大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期的相關(guān)性。
　　結(jié)果：⑴通過HE染色證實58例石蠟標(biāo)本符合肺腺癌的診斷，且癌腫組織中存在炎癥細(xì)胞浸潤。⑵RT-PCR檢測IL-8mRNA在癌組織及癌旁組織中的基因水平存在顯著差異(P＜0.0

5、5)。⑶免疫組化染色從組織水平證實肺腺癌組織中IL-8的表達(dá)明顯高于癌旁正常肺組織(P＜0.001)。⑷免疫熒光染色從組織水平證實了炎癥因子IL-8在肺癌組織表達(dá)明顯增高。⑸ELISA實驗從蛋白水平證實了在肺腺癌組織中的水平升高且與癌旁正常肺組織的水平差異有顯著性(P＜0.01)的炎癥因子為IL-8。⑹流式細(xì)胞儀檢測進(jìn)一步證實炎癥因子IL-8來自于肺腺癌組織中的炎癥細(xì)胞。⑺結(jié)合臨床病理特征結(jié)果顯示，當(dāng)腫塊≥7cm時，IL-8表達(dá)顯著增高

6、（T3、T4組高于T2、 T1組），差異具有顯著性(P＜0.01);而T1與T2相比差異不顯著(P＞0.05)，T3與T4相比差異也不顯著(P＞0.05)。淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陽性的IL-8表達(dá)明顯高于淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陰性者，差異顯著(P＜0.01);并且隨著肺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移級別增加（N0→N1→N2），IL-8蛋白在肺癌中表達(dá)也在增高，差異具有顯著性(P＜0.05)。肺腺癌組織中IL-8的表達(dá)水平隨著臨床分期的進(jìn)展而升高，Ⅱ期、Ⅲ期組高于 Ⅰ期組，差異

7、具有顯著性(P＜0.01);Ⅱ期組與Ⅲ期組比較，差異同樣具有顯著性(P＜0.01)。采用Pearson相關(guān)性分析，IL-8與T分期、N分期及臨床分期均呈正相關(guān)(P＜0.01)。
　　結(jié)論：①本研究分別從組織、細(xì)胞、蛋白及基因分子水平證實IL-8在肺腺癌組織的表達(dá)明顯高于癌旁的正常組織，差異具有顯著性(P＜0.01);研究還觀察到腫瘤細(xì)胞和腫瘤間隙浸潤的炎癥細(xì)胞都可以分泌IL-8，但以炎癥細(xì)胞分泌為主。②結(jié)合患者的臨床及病理特征，證