Eg5基因表達(dá)調(diào)控及其抑制劑抗胰腺癌作用的分子機(jī)制.pdf

1、在細(xì)胞分裂過(guò)程中,有絲分裂紡錘體控制染色體的分離。紡錘體是具有雙極性的結(jié)構(gòu),由微管和微管結(jié)合蛋白組成。紡錘體的雙極性對(duì)于染色體的精確分離是必需的,而雙極性的形成則依賴(lài)于微管依賴(lài)性馬達(dá)蛋白。Eg5是屬于驅(qū)動(dòng)蛋白家族的一個(gè)馬達(dá)蛋白,在雙極紡錘體的組裝過(guò)程中發(fā)揮關(guān)鍵作用。除了在紡錘體組裝中起作用之外,最近的研究表明Eg5可能通過(guò)影響基因組的穩(wěn)定性,參與腫瘤的發(fā)生發(fā)展。但是,關(guān)于Eg5在細(xì)胞中的表達(dá)是如何被調(diào)控的一直不清楚。另外,抑制Eg5活性

2、的小分子化合物作為治療癌癥的新一代藥物是當(dāng)前研究的熱點(diǎn),有些Eg5抑制劑已經(jīng)作為癌癥化療藥物進(jìn)入臨床試驗(yàn)階段。由于Eg5主要在處于分裂中的細(xì)胞內(nèi)起作用,在分裂后的神經(jīng)細(xì)胞中很難被檢測(cè)到,因此在癌癥治療中Eg5抑制劑可能具有比微管抑制劑(常引起神經(jīng)毒性)更好的特異性。至于Eg5抑制劑在胰腺癌這一惡性腫瘤中起什么作用,目前尚不清楚。
　　 本論文對(duì)Eg5基因表達(dá)調(diào)控及其抑制劑抗胰腺癌作用的分子機(jī)制進(jìn)行了研究,以加深對(duì)Eg5基因表達(dá)及

3、其功能的理解,并為Eg5抑制劑在胰腺癌治療上的應(yīng)用提供理論依據(jù)。
　　 在第一部分,本研究發(fā)現(xiàn)細(xì)胞中Eg5的表達(dá)水平受到E3泛素連接酶Parkin的負(fù)調(diào)控,Parkin不是通過(guò)泛素-蛋白酶體途徑來(lái)促進(jìn)Eg5的降解,而是通過(guò)阻止轉(zhuǎn)錄因子c-Jun與Eg5啟動(dòng)子上的AP1位點(diǎn)的結(jié)合來(lái)抑制Eg5基因的轉(zhuǎn)錄。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn),Parkin使蛋白激酶JNK失活,從而導(dǎo)致c-Jun的磷酸化程度降低,而JNK的失活則依賴(lài)于Parkin對(duì)Hsp7

4、0在多個(gè)位點(diǎn)的單泛素化。Hsp70的單泛素化和隨后的JNK-c-Jun途徑的失活對(duì)于Parkin下調(diào)Eg5的表達(dá)都是十分重要的。這些結(jié)果揭示了Parkin的一個(gè)新功能,即通過(guò)Hsp70-JNK-c-Jun信號(hào)途徑調(diào)節(jié)Eg5的基因表達(dá)。
　　 在第二部分,本研究發(fā)現(xiàn)Eg5的小分子抑制劑能阻斷胰腺癌細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂,抑制胰腺癌細(xì)胞的增殖,進(jìn)而誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的發(fā)生。Eg5抑制劑所引起的有絲分裂的阻斷歸因于其對(duì)紡錘體形成的影響和對(duì)紡錘體檢