胚胎腦組織移植后小膠質(zhì)細(xì)胞的形態(tài)變化和功能研究.pdf

1、外傷型腦損傷是一種常見的中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病，目前尚無有效的臨床治愈方案。胚胎腦組織移植是對損傷后中樞神經(jīng)系統(tǒng)修復(fù)的手段之一，為補充腦損傷后丟失的神經(jīng)元并重建原有的神經(jīng)環(huán)路提供了新的途徑。經(jīng)歷外傷型腦損傷后，大腦的免疫應(yīng)答反應(yīng)將對其恢復(fù)產(chǎn)生重要的影響。小膠質(zhì)細(xì)胞作為中樞神經(jīng)系統(tǒng)中重要的免疫細(xì)胞，在移植塊組織中的結(jié)構(gòu)和功能尚不明確。
　　本實驗選用THY1-YFP H-line、CX3CR1GFP/+兩種轉(zhuǎn)基因小鼠，以及C57BL/6野

2、生型小鼠為材料構(gòu)建外傷型腦損傷后胚胎腦組織移植模型，并通過GW2580對小鼠大腦中小膠質(zhì)細(xì)胞的增殖進(jìn)行抑制。利用免疫熒光染色、激光共聚焦以及活體雙光子成像等技術(shù)對胚胎腦組織移植塊中小膠質(zhì)細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能進(jìn)行了研究。
　　疲勞轉(zhuǎn)棒測試及前肢抓力測試顯示，對腦損傷后小鼠進(jìn)行胚胎腦組織移植，其運動功能的恢復(fù)顯著提高。將THY1-YFP H-line胎鼠皮層組織移植到C57BL/6野生型成年小鼠損傷灶后發(fā)現(xiàn)，移植塊組織內(nèi)的神經(jīng)元軸突能夠投

3、射至受體大腦中(60d)。雙光子活體成像數(shù)據(jù)結(jié)合TUNEL染色結(jié)果顯示，在移植后的24h內(nèi)，移植塊內(nèi)的小膠質(zhì)細(xì)胞會逐漸凋亡并消失。隨后，受體大腦中的小膠質(zhì)細(xì)胞會遷移至移植塊組織中。同時發(fā)現(xiàn)，移植塊中小膠質(zhì)細(xì)胞的形態(tài)經(jīng)歷了從最初的激活態(tài)逐漸恢復(fù)靜息態(tài)的過程。用GW2580阻斷小膠質(zhì)細(xì)胞的增殖途徑后發(fā)現(xiàn)，移植塊的可存活面積顯著下降。這表明胚胎移植模型中小膠質(zhì)細(xì)胞的增殖有利于移植塊的存活。本實驗的研究結(jié)果為外傷型腦損傷的臨床治療提供了一定的理