依維莫司片人體藥代動(dòng)力學(xué)研究.pdf

1、目的:
　　1、建立特異、靈敏、快速、重現(xiàn)性好的在線固相萃取(online-SPE)-液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(LC-MS/MS)分析方法測定全血中依維莫司濃度。
　　2、對山東新時(shí)代藥業(yè)有限公司生產(chǎn)的依維莫司片進(jìn)行人體藥代動(dòng)力學(xué)研究，為該藥的申報(bào)及臨床應(yīng)用提供依據(jù)。
　　方法:
　　1、依維莫司全血樣本200μL與20μL內(nèi)標(biāo)混合后經(jīng)0.4 M硫酸鋅80％甲醇水溶液處理，取上清液經(jīng)online-SPE，以10％A（含

2、0.1％甲酸5 mmol·L-1甲酸銨水溶液）:90％B（含0.1％甲酸甲醇溶液）為流動(dòng)相，Waters SunFireTM C18(4.6 mm×150mm，3.5μm)為分析柱;進(jìn)樣量50μL;室溫下測定;采用正離子模式，MRM掃描，依維莫司m/z975.8→908.6，內(nèi)標(biāo)m/z809.6→756.7，分析時(shí)間為5 min。
　　2、本試驗(yàn)包括2部分研究內(nèi)容:(1)單次給藥藥代動(dòng)力學(xué)研究（11例）:采用1制劑3劑量（分別服用

3、依維莫司片0.75 mg、1.5 mg和3 mg）3周期隨機(jī)交叉自身對照試驗(yàn)設(shè)計(jì)方法。(2)多次給藥藥代動(dòng)力學(xué)研究（11例）:采用1制劑2劑量（分別服用依維莫司片0.75mg、1.5mg）2周期隨機(jī)交叉自身對照試驗(yàn)設(shè)計(jì)方法。試驗(yàn)樣本用online-SPE-LC-MS/MS方法檢測，采用Pharsight的WinNonlin6.3軟件進(jìn)行藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)計(jì)算。
　　結(jié)果:
　　1、依維莫司在0.201～100.7 ng·mL-1

4、的范圍內(nèi)線性良好(r=0.9998±0.0002)，最低定量限為0.201 ng·mL-1，回收率在99.2～105.4％之間，以RSD表示的日內(nèi)與日間精密度均小于8％，過程效率良好，高中低三個(gè)濃度的RSD分別為3.67％、4.79％和4.03％，所有穩(wěn)定性考察項(xiàng)目結(jié)果均符合要求。
　　2、(1)計(jì)算求得單次口服0.75 mg、1.5 mg和3.0 mg依維莫司片后依維莫司的主要藥代動(dòng)力學(xué)數(shù)據(jù)Tmax分別為(0.82±0.16)

5、h、(0.64±0.17)h和(0.73±0.21) h,Cmax分別為(4.42±1.18) ng·mL-1、(9.47±1.72) ng·mL-1和(17.30±5.19) ng·mL-1,AUC0-120分別為(22.86±5.80)ng·mL-1·h、(59.10±12.57)ng·mL-1·h和(118.14±25.96)ng·mL-1·h, AUC0-∞分別為(29.99±7.87) ng·mL-1·h、(70.95±13.

6、15) ng·mL-1·h和(129.90±25.67) ng·mL-1·h, t1/2z分別為(20.90±9.24) h、(32.06±6.94)h和(31.82±5.51)h, CLz/F分別為(26.88±8.02)L·h-1、(21.83±4.10)L·h-1和(23.72±3.54)L·h-1, Vz/F分別為(728.93±184.25) L、(981.33±142.98)L和(1087.52±259.48)L, MRT0

7、-120分別為(10.44±3.45) h、(18.16±5.58)h和(22.04±3.71)h，MRT0-∞分別為(24.09±9.54) h、(34.23±8.01)h和(32.96±6.10) h。
　　(2)計(jì)算求得多次口服0.75 mg和1.5 mg依維莫司片后依維莫司的主要藥代動(dòng)力學(xué)數(shù)據(jù)Tmax分別為(0.68±0.20)h和(0.61±0.13)h，Css_max分別為(8.07±2.94)ng·mL-1和(17.

8、14±6.88) ng·mL-1, Css_min分別為(2.19±0.77) ng·mL-1和(3.93±1.47)ng·mL-1, Cav分別為(3.44±1.08) ng·mL-1和(6.69±2.29) ng·mL-1, AUCss分別為（41.26±12.97） ng·mL-1·h和（80.25±27.49） ng·mL-1·h, AUC0-120分別為（126.27±48.96）ng·mL-1·h和（246.42±105.7

9、7）ng·mL-1·h, AUC0-∞分別為(140.42±52.21) ng·mL-1·h和(264.46±111.76) ng·mL-1·h,t1/2z分別為(33.06±4.19)h和(29.16±5.22) h, CLss/F分別為(19.95±6.62) L·h-1和(21.43±9.58) L·h-1,Vz/F分別為(938.65±281.99)L和(898.42±455.30) L, MRT0-∞分別為(33.08±4.1

10、4)h和(31.46±5.65)h, DF分別為(169.62±34.16)％和（194.55±44.31）％，AccumulationIndex分別為4.50±0.50和4.03±0.62。
　　結(jié)論:
　　1、本試驗(yàn)所建立的online-SPE-LC-MS/MS方法經(jīng)驗(yàn)證，符合試驗(yàn)要求，可用于依維莫司片的藥代動(dòng)力學(xué)研究。
　　2、單次口服依維莫司片各給藥劑量組的體內(nèi)依維莫司的血藥峰濃度和藥時(shí)曲線下面積均表現(xiàn)出劑量依