環(huán)絲氨酸人體藥代動(dòng)力學(xué)研究.pdf

1、背景：結(jié)核病是由結(jié)核桿菌感染引起的慢性傳染病。結(jié)核菌可能侵入人體全身各種器官，但主要侵犯肺臟。中國(guó)每年死于結(jié)核病的人約25萬之多，是各類傳染病死亡人數(shù)總和的兩倍多。
　　環(huán)絲氨酸適用于敏感菌引起的、初始治療（鏈霉素、異煙肼、利福平和乙胺丁醇）不足的活性肺和肺外結(jié)核（包括腎結(jié)核）。環(huán)絲氨酸對(duì)結(jié)核分枝桿菌具有較好的抑制作用，但仍較異煙肼、鏈霉素等一線抗結(jié)核藥弱，優(yōu)點(diǎn)是不易產(chǎn)生耐藥性，對(duì)耐藥結(jié)核菌也有效，其作用機(jī)制為抑制結(jié)核分支桿菌的細(xì)

2、胞壁合成。
　　近年來，由于結(jié)核菌耐藥的頻繁發(fā)生，本品越來越受到重視和廣泛的應(yīng)用。目前，國(guó)內(nèi)有關(guān)環(huán)絲氨酸研究的報(bào)道較少，更鮮見藥動(dòng)學(xué)相關(guān)報(bào)道。
　　目的：建立快速、靈敏、專屬的高效液相色譜質(zhì)譜串聯(lián)法（HPLC-MS/MS）測(cè)定人血漿中環(huán)絲氨酸的濃度，并應(yīng)用于環(huán)絲氨酸膠囊藥代動(dòng)力學(xué)研究。觀察環(huán)絲氨酸在單多次給藥后，在人體血液中的藥代動(dòng)力學(xué)變化特點(diǎn)，為環(huán)絲氨酸的臨床應(yīng)用和申報(bào)提供依據(jù)。
　　方法：采用HPLC-MS/MS法

3、測(cè)定血藥濃度，以煙酸為內(nèi)標(biāo)，血漿經(jīng)甲醇沉淀蛋白后，采用ZORBAX SB-Aq(4.6×250mm,5μm)色譜柱分離。流動(dòng)相為甲醇-含5mM甲酸銨和0.05％甲酸的水溶液（85:15，v/v）流速0.8mL/min，柱后6:4分流，40%導(dǎo)入質(zhì)譜，使用等度洗脫，進(jìn)樣體積2μl,樣品分析時(shí)間為5 min。采用大氣壓電噴霧離子源（ESI），正離子模式、多重反應(yīng)選擇離子監(jiān)測(cè)（MRM），環(huán)絲氨酸母離子及子離子為m/z102.8?75.0（離子

4、去簇電壓（DP）：16V，碰撞能（CE）：13V，碰撞室出口電壓（CXP）：12V），內(nèi)標(biāo)煙酸母離子及子離子為m/z124.2?80.1（離子去簇電壓（DP）：53V，碰撞能（CE）：14V，碰撞室出口電壓（CXP）：5V）。12名健康受試者（男、女各半）采用1制劑3劑量（分別服用環(huán)絲氨酸膠囊250 mg、500 mg和1000 mg）3周期隨機(jī)交叉自身對(duì)照試驗(yàn)設(shè)計(jì)，進(jìn)行單次給藥藥代動(dòng)力學(xué)研究；12名健康受試者（男、女各半）采用單劑量單

5、周期試驗(yàn)設(shè)計(jì)，每天早晚相同時(shí)間服藥，每次服藥250 mg，連續(xù)給藥13次后再按照預(yù)設(shè)的時(shí)間點(diǎn)采血，進(jìn)行多次給藥藥動(dòng)學(xué)研究。
　　結(jié)果：測(cè)定人血漿中環(huán)絲氨酸的線性范圍為0.4995~99.900μg/mL，定量下線為0.4995μg/mL，日內(nèi)、日間精密度（RSD）均小于6.14%。此方法應(yīng)用于中國(guó)人環(huán)絲氨酸膠囊人體藥代動(dòng)力學(xué)研究。單次給藥250 mg、500 mg和1000 mg3劑量后主要藥動(dòng)學(xué)參數(shù)分別為：Cmax：13.81±

6、2.31、22.89±5.47、52.79±12.76μg/mL；Tmax：0.70±0.55、1.03±1.02、0.90±0.99h；AUC0-∞：190.13±58.45、386.54±153.78、829.43±292.25μg·h/mL；給藥250mg13次后后主要藥動(dòng)學(xué)參數(shù)為：Cmax：26.91±9.68μg/mL；Tmax：1.19±0.84 h；AUC0-∞：485.39±288.55μg·h/mL。
　　結(jié)論：

7、建立了HPLC-MS/MS法測(cè)定人血漿中環(huán)絲氨酸的濃度，此方法選擇性強(qiáng)、靈敏度好，成功應(yīng)用于環(huán)絲氨酸膠囊的藥代動(dòng)力學(xué)研究。單次口服環(huán)絲氨酸膠囊各給藥劑量組（250 mg、500 mg和1000 mg）的體內(nèi)環(huán)絲氨酸的血藥峰濃度(cmax)和藥時(shí)曲線下面積(AUCs均)表現(xiàn)出劑量依賴性，環(huán)絲氨酸血漿藥物清除半衰期(t1/2z)的均值（最小值～最大值）為14.19（3.60～26.19）h，與給藥劑量無關(guān)。AUC0-t，AUC0-∞，CLz

8、，Tmax及Cmax不同性別之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p>0.05），t1/2z，MRT0-t，MRT0-∞，Vz不同性別之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05），VZ參數(shù)經(jīng)體重校正后，經(jīng)t檢驗(yàn)性別間差異仍有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05）。多次口服環(huán)絲氨酸膠囊，每次250 mg，連續(xù)13次，環(huán)絲氨酸的Cmax，AUC0-t，AUC0-∞與單次給藥差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05)，按200mg/Q12h給藥，服用本品后環(huán)絲氨酸體內(nèi)蓄積指數(shù)為2.28±