發(fā)散式?jīng)_擊波對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體內(nèi)成軟骨分化影響.pdf

1、目的：體外沖擊波不僅可以通過(guò)增加血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的表達(dá)，增加心肌有效灌注和改善左室重塑，從而改善缺血性心臟病患者癥狀，治療缺血性心臟病;而且可以使骨細(xì)胞將機(jī)械信號(hào)轉(zhuǎn)化為生化信號(hào)后傳導(dǎo)給破骨細(xì)胞和成骨細(xì)胞，引起骨的重建，治療骨折延遲愈合或不愈合，這提示沖擊波具有促進(jìn)組織再生的作用。然而有關(guān)沖擊波對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的成軟骨分化影響的研究并不多。本研究利用不同能量的發(fā)散式?jīng)_擊波刺激骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞，觀察其成軟骨效果，探究沖擊波在體內(nèi)對(duì)骨髓間充

2、質(zhì)干細(xì)胞成軟骨分化的調(diào)節(jié)作用。
　　方法：從骨髓中分離骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞，培養(yǎng)至P3代，通過(guò)倒置顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)，流式分析細(xì)胞表面相關(guān)抗原的表達(dá)和誘導(dǎo)成骨成脂分化能力鑒定為骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞。在探索沖擊波調(diào)控干細(xì)胞成軟骨分化時(shí)，我們先后采用裸鼠皮下細(xì)胞種植模型和新西蘭大白兔膝關(guān)節(jié)軟骨損傷兩種動(dòng)物模型。首先將裸鼠分為4組，分別為對(duì)照組（藻酸鈣種植到裸鼠皮下），干細(xì)胞組（包裹干細(xì)胞的藻酸鈣種植到裸鼠皮下），低能量沖擊波組(2.0bar，

3、200次，10Hz的沖擊波刺激干細(xì)胞后，包裹在藻酸鈣中種植到裸鼠皮下)，高能量沖擊波組(3.0bar，200次，10Hz的沖擊波刺激干細(xì)胞后，包裹在藻酸鈣中種植到裸鼠皮下)。種植后3個(gè)月和12個(gè)月，對(duì)樣本進(jìn)行組織學(xué)檢測(cè)。然后將新西蘭大白兔分為4組，建立膝關(guān)節(jié)軟骨損傷模型，根據(jù)分組將細(xì)胞或支架移植到軟骨損傷區(qū)，分組和細(xì)胞處理步驟同裸鼠，移植后3個(gè)月，樣本進(jìn)行組織學(xué)檢測(cè)。
　　結(jié)果：在裸鼠皮下細(xì)胞種植實(shí)驗(yàn)中，兩個(gè)沖擊波組樣本比其余兩組

4、體積更大，Ⅱ膠原和蛋白多糖含量更多，以3.bar壓力的沖擊波作用效果最佳。在兔膝關(guān)節(jié)軟骨損傷修復(fù)實(shí)驗(yàn)中，兩個(gè)沖擊波組的軟骨損傷區(qū)域修復(fù)組織更多，Ⅱ膠原和蛋白多糖含量更多，細(xì)胞排列更加有序，與周圍組織鏈接更加緊密，以3.bar的沖擊波作用效果最佳。
　　結(jié)論：1.發(fā)散式?jīng)_擊波在體內(nèi)具有促進(jìn)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向軟骨細(xì)胞分化的影響。
　　2.沖擊波的促進(jìn)成軟骨作用與能量相關(guān)，壓力為3.0bar時(shí)，沖擊波的促進(jìn)成軟骨分化作用優(yōu)于2.0