羅格列酮對人肺腺癌A549細胞整合素β-,1-表達的影響.pdf

1、目的：探討過氧化物酶體增殖因子活化受體γ(peroxisome proliferator-adtivated receptor gammar,PPARγ）配體羅格列酮（Rosiglitazone RSG）對肺腺癌A549細胞粘附分子整合素β1表達的影響及其作用機制。 方法：體外培養(yǎng)人肺腺癌A549細胞，分別或聯(lián)合應用不同濃度的羅格列酮、PPARγ阻斷劑GW9662組(10μmol·L-1)、PD98059組(20μmol· L-

2、1)干預處理人肺腺癌細胞系（A549）細胞，用逆轉錄-聚合酶聯(lián)反應（RT-PCR）和間接免疫熒光標記流式細胞儀分別測定羅格列酮對A549細胞PPARγ、整合素β1mRNA和蛋白表達的影響。 結果：RT-PCR結果顯示:A549細胞表達PPARγ和整合素β1,50μmol L-1羅格列酮作用A549細胞0h,4h,8h,12h,24h后,整合素β1 mRNA的表達下降，與0h組即對照組比較，羅格列酮處理8小時組對整合素β1 mRN

3、A的表達的抑制作用最強（P<0.05）；用不同濃度的羅格列酮 (0、12.5、25、50、100μmol L-1 ) 處理細胞8小時后，與空白對照組比較，50、100μmol/L羅格列酮組的PPARγmRNA的擴增產物明顯增多, 羅格列酮呈劑量依賴關系激動PPARγmRNA的表達(P<0.05)； 50、100μmol/L羅格列酮組的整合素β1 mRNA的表達呈濃度依賴性降低，100μmol/L羅格列酮組的整合素β1表達顯著降低（P<0

4、.05）；與100μmol L-1羅格列酮組相比較，PPARγ的阻斷劑GW9662(10μmol L-1 )干預羅格列酮 (100μmol L-1 ) 組見部分阻斷上述作用（P<0.05），PD98059(20μmol L-1 )干預羅格列酮(100μmol L-1)組能增加PPARγ mRNA的表達(P<0.05)；間接免疫熒光標記流式結果顯示:用0、50μmol/L 、100μmol/L 、GW9662+100μmol/L、PD98

5、059+100μmol/L、GW9662、 PD98059分別處理A549細胞8h，空白組整合素β1 表達的熒光強度(％)空白對照組為67.8±2.22, 50、 100μmol· L-1 組分別為42.633±2.550,20.768±3.682, 100μmol· L-1羅格列酮明顯抑制整合素β1 蛋白的表達（P﹤0.05）；GW9662+100μmol/L、PD98059+100μmol/L整合素β1 表達的熒光強度(％)分別是2

6、4.1± 4.71,30.867 ±3.585,與100μmol L-1羅格列酮組相比較，PD98059+羅格列酮100μmol L-1組整合素的表達上調(P<0.05) 。GW9662+羅格列酮100μmol L-1組整合素的表達上調。 結論： 1.羅格列酮激動A549細胞PPARγ的表達，抑制整合素β1的mRNA及蛋白的表達，呈劑量依賴關系。 2．用PPARγ阻斷劑GW9662，可取消其對整合素β1的抑制作用