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文檔簡介
1、目的:
小細胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)是全球范圍內(nèi)最主要的癌癥相關(guān)死亡因素之一。吳茱萸堿(evodiamine,EVO)是一種被寄予厚望的抗腫瘤候選藥物,其某些衍生物可能具有更強的抗腫瘤作用。PI3K/AKT信號轉(zhuǎn)導通路活性異常在SCLC的發(fā)生和發(fā)展中起著重要作用。本研究目的在于探究EVO及其衍生物在SCLC細胞中的抗腫瘤效果,以及PI3K/AKT通路在此過程中發(fā)揮的作用。
方法
2、:
選取SCLC細胞H1688和H446為主要對象,以不同劑量和作用時間的EVO處理細胞,通過MTT法檢測細胞活性、WB檢測p-AKT及其上下游相關(guān)蛋白的表達、FCM檢測凋亡率、臺盼藍外排實驗檢測細胞死亡情況、熒光染色觀察細胞凋亡情況,考察PI3K/AKT通路在EVO誘導細胞凋亡中的作用,并使用PI3K/AKT通路激動劑IGF-1和抑制劑LY294002加以驗證。以相同方法對EVO的碳10位氨基取代衍生物(C10-amino
3、EVO derivative,EVO-NH2)進行研究。
結(jié)果:
本研究發(fā)現(xiàn)EVO顯著抑制SCLC細胞H1688和H446細胞生長、誘導細胞凋亡。進一步的實驗結(jié)果還表明,PI3K/AKT通路中的關(guān)鍵分子p-AKT受到EVO的抑制,其下游的凋亡相關(guān)蛋白和上游的抑制因子PTEN也受到EVO的調(diào)控。而當PI3K/AKT通路被其激活劑IGF-1重新激活時,EVO誘導凋亡的作用被消除或在一定程度上減弱。此外,我們發(fā)現(xiàn)EVO衍生
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