吳茱萸堿及其衍生物抑制PI3K-AKT通路誘導(dǎo)小細(xì)胞肺癌細(xì)胞凋亡.pdf

1、目的:
　　小細(xì)胞肺癌(small cell lung cancer，SCLC)是全球范圍內(nèi)最主要的癌癥相關(guān)死亡因素之一。吳茱萸堿(evodiamine，EVO)是一種被寄予厚望的抗腫瘤候選藥物，其某些衍生物可能具有更強(qiáng)的抗腫瘤作用。PI3K/AKT信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路活性異常在SCLC的發(fā)生和發(fā)展中起著重要作用。本研究目的在于探究EVO及其衍生物在SCLC細(xì)胞中的抗腫瘤效果，以及PI3K/AKT通路在此過程中發(fā)揮的作用。
　　方法

2、:
　　選取SCLC細(xì)胞H1688和H446為主要對(duì)象，以不同劑量和作用時(shí)間的EVO處理細(xì)胞，通過MTT法檢測(cè)細(xì)胞活性、WB檢測(cè)p-AKT及其上下游相關(guān)蛋白的表達(dá)、FCM檢測(cè)凋亡率、臺(tái)盼藍(lán)外排實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞死亡情況、熒光染色觀察細(xì)胞凋亡情況，考察PI3K/AKT通路在EVO誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡中的作用，并使用PI3K/AKT通路激動(dòng)劑IGF-1和抑制劑LY294002加以驗(yàn)證。以相同方法對(duì)EVO的碳10位氨基取代衍生物(C10-amino

3、EVO derivative，EVO-NH2)進(jìn)行研究。
　　結(jié)果:
　　本研究發(fā)現(xiàn)EVO顯著抑制SCLC細(xì)胞H1688和H446細(xì)胞生長、誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)結(jié)果還表明，PI3K/AKT通路中的關(guān)鍵分子p-AKT受到EVO的抑制，其下游的凋亡相關(guān)蛋白和上游的抑制因子PTEN也受到EVO的調(diào)控。而當(dāng)PI3K/AKT通路被其激活劑IGF-1重新激活時(shí)，EVO誘導(dǎo)凋亡的作用被消除或在一定程度上減弱。此外，我們發(fā)現(xiàn)EVO衍生