冬蟲夏草相關(guān)菌與中國(guó)被毛孢之間關(guān)系的研究.pdf

1、本文通過(guò)對(duì)冬蟲夏草的資源分布，生活史，化學(xué)成分及藥理學(xué)特性，無(wú)性型等方面的研究，發(fā)現(xiàn)目前還沒有一個(gè)準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)?zāi)軌蜃C明有多少種真菌參與了冬蟲夏草的形成過(guò)程。本試驗(yàn)組已提出了冬蟲夏草相關(guān)菌，它是從冬蟲夏草中分離，對(duì)中國(guó)被毛孢有作用并可侵染蝙蝠蛾幼蟲的那些菌株的研究。利用已分離鑒定的6株抑制中國(guó)被毛孢生長(zhǎng)的冬蟲夏草相關(guān)菌，研究冬蟲夏草相關(guān)菌和中國(guó)被毛孢的生長(zhǎng)關(guān)系。
　　以新鮮野生冬蟲夏草為材料，分別提取不同發(fā)育階段的不同部位的冬蟲夏草總

2、DNA，采用真菌通用引物（ITS1/ITS4）進(jìn)行PCR擴(kuò)增后將產(chǎn)物測(cè)序，上網(wǎng)分析比對(duì)。為了進(jìn)一步研究冬蟲夏草相關(guān)菌對(duì)中國(guó)被毛孢的作用效果，將本試驗(yàn)組已分離得到的6株冬蟲夏草相關(guān)菌兩兩組合為21組相關(guān)菌組合與中國(guó)被毛孢進(jìn)行對(duì)歭培養(yǎng)。并對(duì)冬蟲夏草相關(guān)菌發(fā)酵液對(duì)中國(guó)被毛孢生長(zhǎng)的影響進(jìn)行了培養(yǎng)試驗(yàn)。此外，還用冬蟲夏草相關(guān)菌與中國(guó)被毛孢復(fù)合菌對(duì)蝙蝠蛾幼蟲進(jìn)行侵染試驗(yàn)。試驗(yàn)得到的主要結(jié)果如下：
　?。?）分析新鮮野生冬蟲夏草總DNA發(fā)現(xiàn)，不

3、同生長(zhǎng)階段不同部位冬蟲夏草中用常規(guī)PCR最易檢測(cè)到的真菌是冬蟲夏草菌（Ophiocordyceps sinensis）。
　?。?）冬蟲夏草相關(guān)菌組合對(duì)中國(guó)被毛孢對(duì)歭試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，在提前10d接種中國(guó)被毛孢時(shí)，21組相關(guān)菌組合對(duì)中國(guó)被毛孢均產(chǎn)生了不同程度的抑制作用，抑制率均較小，在4.0-9.0％之間。提前20d和提前30d接種時(shí)，冬蟲夏草相關(guān)菌各組合對(duì)中國(guó)被毛孢的抑菌率隨著提前接種中國(guó)被毛孢時(shí)間的增加而減?。≒<0.05），有部分

4、相關(guān)菌組合對(duì)中國(guó)被毛孢的生長(zhǎng)有一定的促進(jìn)作用。
　?。?）測(cè)定冬蟲夏草相關(guān)菌不同發(fā)酵液對(duì)液體和固體培養(yǎng)基中中國(guó)被毛孢生長(zhǎng)干重和菌落直徑發(fā)現(xiàn)，在液體培養(yǎng)基中，隨著發(fā)酵液添加比例的增加，中國(guó)被毛孢的干重并沒有隨著發(fā)酵時(shí)間的延長(zhǎng)而減?。辉诠腆w培養(yǎng)基上，發(fā)酵液對(duì)中國(guó)被毛孢的生長(zhǎng)起到了一定的促進(jìn)作用，不同的冬蟲夏草相關(guān)菌發(fā)酵液的促進(jìn)作用各不相同，說(shuō)明在冬蟲夏草相關(guān)菌的發(fā)酵液中不含抑制中國(guó)被毛孢生長(zhǎng)的物質(zhì)。冬蟲夏草相關(guān)菌對(duì)中國(guó)被毛孢的抑制作用