中國(guó)被毛孢甾醇提取最優(yōu)條件的正交法研究.pdf

1、冬蟲(chóng)夏草[Cordyceps sinensis(Berk.)Sacc.]是傳統(tǒng)名貴中藥,具有保護(hù)呼吸系統(tǒng)、維護(hù)腎功能、抗癌、抗氧化等作用。其無(wú)性型為中國(guó)被毛孢(Hirsutellasinensis Liu,Guo,Yu& Zeng),具有廣闊應(yīng)用前景。甾醇類物質(zhì)是冬蟲(chóng)夏草主要活性成分之一,其中麥角甾醇是真菌特征甾醇,具有顯著的抗癌活性,本課題主要對(duì)中國(guó)被毛孢甾醇提取的最優(yōu)條件進(jìn)行研究。
　　 對(duì)磷硫鐵法和香草醛-冰醋酸比色法測(cè)定

2、總甾醇含量進(jìn)行了方法學(xué)研究,2種方法顯色1小時(shí)后吸光值變化幅度均小于1％,穩(wěn)定性較好；精密度RSD分別為1.9％和3.6％；回收率分別為126.3±16.5％和105.4±3.6％,香草醛-冰醋酸法準(zhǔn)確度更高；選擇香草醛-冰醋酸法為中國(guó)被毛孢總甾醇含量的測(cè)定方法。單因素實(shí)驗(yàn)考查皂化用堿量、乙醇濃度、提取時(shí)間、料液比、提取次數(shù)5個(gè)因素對(duì)超聲波輔助提取總甾醇的影響,發(fā)現(xiàn)皂化用堿量、乙醇濃度、提取次數(shù)三因素相鄰水平差異顯著(P<0.05),而

3、提取時(shí)間、料液比(除1／100外)對(duì)提取影響均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性(P>0.05)；再以KOH／菌絲體比值分別為0、0.5、1,乙醇濃度分別為60％、80％、95％,提取次數(shù)分別為1、2、3的3因素3水平正交法優(yōu)化超聲波輔助提取條件,得最佳提取條件為:KOH／菌絲體比值為1,乙醇濃度為95％,提取3次,并測(cè)得總甾醇含量約為5.016％±0.205％。單因素試驗(yàn)顯示溫度對(duì)熱回流提取效果影響很小；以與超聲波法相同的3因素3水平正交設(shè)計(jì)對(duì)熱回流法進(jìn)