低氧致持續(xù)性肺動(dòng)脈高壓新生鼠PPAR-γ表達(dá)及其與肺血管重構(gòu)關(guān)系的研究.pdf

1、目的:
　　肺血管重構(gòu)是低氧持續(xù)性肺動(dòng)脈高壓的病理基礎(chǔ)，有報(bào)道指出PPAR-γ（Peroxisome proliferator-activated receptor-γ）在肺血管功能中發(fā)揮重要作用。本研究在低氧模型基礎(chǔ)上研究PPAR-γ在低氧持續(xù)性肺動(dòng)脈高壓發(fā)病機(jī)制中的作用及PPAR-γ與肺血管重構(gòu)的關(guān)系。
　　方法:
　　一、動(dòng)物模型
　　新生SD大鼠隨機(jī)分配入低氧組和對(duì)照組，各40只。低氧下建立持續(xù)性肺動(dòng)脈高

2、壓模型。模型組置于低氧環(huán)境中(10-12％ O2)，對(duì)照組置于空氣中(21％ O2)，兩組間每24小時(shí)交換一次母鼠。
　　二、右心室壓力的測(cè)定及右心室肥厚程度的評(píng)估
　　兩組分別于實(shí)驗(yàn)14天取同日齡新生大鼠各8只，水合氯醛腹腔注射麻醉后，固定在手術(shù)臺(tái)上，行氣管插管，接小動(dòng)物呼吸機(jī)，右心室連接壓力傳感器，記錄每一次的血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)，每次測(cè)量前均應(yīng)調(diào)零，隨后放血處死，減去心房和游離的大血管，沿著房室間隔剪下右心室壁，分別稱量右心

3、室、左心室和室間隔的重量。通過計(jì)算右心室與左心室及室間隔的重量之比來(lái)檢測(cè)右心室肥厚程度。
　　三、肺血管變化的檢測(cè)
　　于實(shí)驗(yàn)3天、5天、7天和14天，應(yīng)用HE染色及α-SMA的免疫組織化學(xué)染色后，通過光學(xué)顯微鏡觀察每一組肺小動(dòng)脈形態(tài)變化，并測(cè)定肺血管中層厚度與血管外徑之比(Intima-media thickness/external diameter ratio MT)和肺血管中層橫截面積與總橫截面積之比(medial

4、wall cross sectional area/vessel total cross-sectionalarea ratio MA)。
　　四、肺組織中PPAR-γ表達(dá)變化的檢測(cè)
　　在實(shí)驗(yàn)3天、5天、7天和14天，分別應(yīng)用免疫組織化學(xué)、Westen bloting技術(shù)和Real Time PCR檢測(cè)肺組織中PPAR-γ的表達(dá)變化。
　　結(jié)果:
　　一、右心室壓力的測(cè)定及右心室肥厚程度的檢測(cè)
　　與對(duì)照

5、組相比，實(shí)驗(yàn)14天時(shí)，模型組右心室壓力明顯升高，右心室與左心室及室間隔之比明顯升高，兩組間有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　二、肺血管變化的評(píng)估
　　與照組相比，模型組在實(shí)驗(yàn)7、14天時(shí)，MT和MA均明顯升高。α-SMA在正常肺組織中主要表達(dá)于細(xì)支氣管和終末細(xì)支氣管以及伴行的肺血管，在肺泡血管中表達(dá)較少或是沒有。模型組低氧3、5天時(shí)，α-SMA亦主要表達(dá)于細(xì)支氣管和終末細(xì)支氣管以及伴行的肺血管，腺泡管伴行的肺小動(dòng)脈管壁α-SMA表達(dá)與對(duì)照

6、組相比無(wú)明顯差異，但在低氧7天時(shí)，腺泡管伴行的肺小動(dòng)脈管壁出現(xiàn)α-SMA表達(dá)量出現(xiàn)升高。隨著低氧時(shí)間的延長(zhǎng)，肺泡內(nèi)動(dòng)脈管壁的α-SMA陽(yáng)性染色細(xì)胞逐漸增多，尤以伴行腺泡管的小動(dòng)脈管壁表達(dá)升高幅度較明顯。低氧14天時(shí)可以明顯看到肺泡內(nèi)動(dòng)脈管壁α-SMA表達(dá)。
　　三、肺組織中PPAR-γ表達(dá)變化的檢測(cè)
　　在對(duì)照組中，PPAR-γ在肺組織中主要表達(dá)于肺血管內(nèi)皮細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞及肺泡上皮細(xì)胞，在模型組中，隨著低氧時(shí)間的延長(zhǎng)，PP

7、AR-γ在肺血管壁上的表達(dá)呈下降趨勢(shì)。在實(shí)驗(yàn)5天、7天和14天，其肺組織PPAR-γ mRNA表達(dá)水平、蛋白表達(dá)水平與對(duì)照組相比均明顯下降。
　　結(jié)論:
　　低氧誘導(dǎo)新生大鼠肺血管管壁增厚，管腔狹窄，非肌型小血管肌化，逐漸形成肺動(dòng)脈高壓。 PPAR-γ表達(dá)于大鼠肺組織中，在慢性低氧條件下，隨著低氧暴露時(shí)間的延長(zhǎng)呈下降趨勢(shì)，而肺血管重構(gòu)卻逐漸明顯，并且PPAR-γ變化的時(shí)間早于肺血管重構(gòu)出現(xiàn)的時(shí)間，說明PPAR-γ可能參與抑制