類芽孢桿菌B69抗生素的分離純化、結(jié)構(gòu)鑒定和生物學(xué)活性研究.pdf

1、本實驗從天目山自然保護(hù)區(qū)土壤中分離到一株對革蘭氏陽性菌、革蘭氏陰性菌及真菌都有抗性的產(chǎn)抗菌株B69。經(jīng)形態(tài)學(xué)觀察、生理生化鑒定及16S rDNA序列分析，將其鑒定為類芽孢桿菌Paenibacillus elgii。本研究采用MCI GELCHP20P柱及HPLC等方法，從發(fā)酵液中分離到兩種抗菌物質(zhì)，命名為PelgipeptinA和B，ESI-MS結(jié)果表明它們的分子量分別為1072和1100 Da。結(jié)合ESI-CID-MS和氨基酸分析，確

2、定Pelgipeptin A的可能一級結(jié)構(gòu)為L-Dab-D-Val-L-Leu/Ile-L-Ser-Y1-L-Dab-L-Val-L-Dab-D-Phe-L-Leu/Ile,Pelgipeptin B的為L-Dab-D-Val-L-Leu/Ile-L-Ser-Y2-L-Dab-L-Leu/Ile-L-Dab-D-Phe-L-Leu/Ile，其中Y的結(jié)構(gòu)為脂肪酸鏈。與結(jié)構(gòu)中含有非蛋白源氨基酸Dab的已知抗生素進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)Pelgipep

3、tins和多肽菌素家族成員的結(jié)構(gòu)極其相似，可確定它們屬于這個家族。Pelgipeptin B和Permetin A的分子量相同，結(jié)構(gòu)也極其相近，可能為同一種物質(zhì)。而Pelgipeptin A和任何一種抗生素的化學(xué)結(jié)構(gòu)都不完全相同，可確定為一種新的抗生素。
　　 本文還對抗生素的穩(wěn)定性，體外抗菌活性及植物體內(nèi)抗菌活性進(jìn)行了研究。在穩(wěn)定性實驗中，抗生素在60℃處理2 h后，抗菌活性基本不變，在pH1.0-8.0中處理過夜，活性不受影

4、響，但是在pH9.0，10.0中，活性明顯下降，在pH11.0，12.0中，則完全失活。體外抗菌實驗發(fā)現(xiàn)，Pelgipeptin A和B對實驗中所有的指示菌都有抗性，其中，對耐藥菌表皮葡萄球菌CMCC26069（耐氨芐西林）的最低抑菌濃度(MIC)值分別為3.12和0.78μg/ml，呈現(xiàn)出強(qiáng)烈的抑制作用，這表明Pelgipeptins具有開發(fā)成為醫(yī)藥抗菌制劑的潛力。此外，Pelgipeptins還具有較強(qiáng)的抗真菌能力，能抑制多種土傳病