Skiv2l2通過與Clock和Bmal結合正向調控斑馬魚生物鐘.pdf_第1頁
已閱讀1頁,還剩63頁未讀, 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權,請進行舉報或認領

文檔簡介

1、地球上大多數(shù)生物體呈現(xiàn)以大約24小時為周期的生物節(jié)律,它由生物體內(nèi)源的生物鐘產(chǎn)生并維持。生物鐘對諸如體溫、睡眠周期、代謝及激素分泌等多種基本的生理過程以及行為都具有調控作用。因此,對生物鐘的分子機制及其調控網(wǎng)絡進行研究,有助于解釋人體正常的生理生化過程和行為,并且對防治由生物鐘紊亂所引發(fā)的相關疾病具有十分重要的意義。作為重要的模式生物之一,斑馬魚是研究脊椎動物生物鐘分子機制的理想模型。和小鼠與果蠅類似,斑馬魚生物鐘機制是基于Clock:

2、Bmal異二聚體和Per:Cry復合體的轉錄/翻譯負反饋調節(jié)環(huán)路。除了這些核心生物鐘基因之外,研究發(fā)現(xiàn)許多基因產(chǎn)物具備調節(jié)生物鐘的功能。然而,其他調節(jié)因子如何在斑馬魚生物鐘調控中發(fā)揮作用等重要問題尚缺乏深入研究。在粗鏈脈孢霉中,RNA解旋酶FRH與FRQ蛋白形成復合體 FFC并且抑制WCC介導的轉錄激活作用。目前的研究表明 FRH是粗鏈脈孢霉生物鐘中重要的調節(jié)因子,但是其具體的調節(jié)機制則尚未完全闡明。通過系統(tǒng)樹分析,我們發(fā)現(xiàn)斑馬魚 sk

3、iv2l2與粗鏈脈孢霉 frh屬于同源基因。先前的研究表明該基因在斑馬魚幼魚的黑色素細胞再生中起作用。然而,skiv2l2是否參與生物鐘調控網(wǎng)絡以及具體調控機制尚未有相關研究。
  本研究通過分子生物學和生物化學方法手段探討skiv2l2在斑馬魚生物核心環(huán)路中的功能。熒光定量實時PCR顯示skiv2l2的mRNA在斑馬魚幼體和成魚肝臟中呈現(xiàn)明顯的節(jié)律表達;此外,mRNA水平在bmal1b突變體中其表達下調,但在per1b突變體中上

4、調。對skiv2l2的啟動子進行序列分析發(fā)現(xiàn),其啟動子擁有E-box順式元件;螢光素酶檢驗顯示Clock1a:Bmalb異二聚體能夠增強skiv2l2啟動子的轉錄活性,而Cry1.1a則抑制其活性;染色質免疫沉淀實驗發(fā)現(xiàn)Bmal1b能夠結合skiv2l2啟動子中的E-box順式元件。這些結果表明生物鐘直接調控skiv2l2的表達。盡管skiv2l2純合突變體因魚鰾缺陷難以運動,skiv2l2雜合子突變體則體態(tài)正常。行為檢測發(fā)現(xiàn)skiv2

5、l2雜合突變體游泳節(jié)律異常;核心鐘基因per1a、per1b、per2、per3、cry1.1a、cry1.1b、cry1.2a、cry1.2b以及鐘控基因annat2和pck1等在skiv2l2純合子突變體表達降低。這些結果表明,skiv2l2在斑馬魚生物鐘調控環(huán)路中起到不可或缺的作用。同時,體外細胞轉染實驗表明Skiv2l2的過表達能夠激活Bmal1b:Clock1a介導的轉錄;免疫共沉淀實驗表明 Skiv2l2能夠與 Clock1

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責。
  • 6. 下載文件中如有侵權或不適當內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評論

0/150

提交評論