生物鐘基因DEC2調(diào)控睡眠的分子機制的研究.pdf

1、睡眠作為一項重要的生命過程，占了人生約1/3的時間，與人類的生理及心理健康密切相關(guān)。隨著現(xiàn)代社會壓力的增大，越來越多人出現(xiàn)睡眠障礙。因此，睡眠問題受到越來越多人的關(guān)注，對睡眠調(diào)控機制做深入研究迫切需要。已報道文章發(fā)現(xiàn)生物鐘基因DEC2的384位點發(fā)生突變（P384R）后會引起人類睡眠減少約2h，并且發(fā)現(xiàn)攜帶人類hDEC2-P384R與攜帶hDEC2-WT的小鼠相比表現(xiàn)出活動增加、睡眠減少的表型，進一步研究發(fā)現(xiàn)在果蠅腦內(nèi)調(diào)控睡眠的核心腦區(qū)

2、蘑菇體表達小鼠mDEC2-P384R會導(dǎo)致該突變型果蠅睡眠減少。本課題組前期研究發(fā)現(xiàn)一系列與睡眠相關(guān)的基因在hDEC2-P384R小鼠中表達發(fā)生改變，并發(fā)現(xiàn)于果蠅蘑菇體表達hDEC2-P384R的雄蠅在持續(xù)黑暗（DD）條件下有睡眠顯著減少的表型。
　　為了深入探索生物鐘基因DEC2調(diào)控睡眠的分子機制，本研究以果蠅為研究對象。基于前期研究發(fā)現(xiàn)一系列與睡眠相關(guān)的基因在hDEC2-P384R小鼠中表達發(fā)生改變，本研究在果蠅中利用實時定量

3、RT-PCR（qRT-PCR）檢測這些基因的同源基因是否受到DEC2-P384R突變的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)有10個基因的mRNA水平發(fā)生顯著改變，其中Clock、se、VGlut、ND-20、AP1γ、5-HT7基因的變化方向與小鼠中相同，CG32164、Gsts1、Erk7、Tbh基因變化方向相反。隨后利用se1突變體，AP1γ5H2064突變體，TbhNP0208突變體以及Tbh RNAi，VGlut RNAi品系的果蠅并檢測它們是否與D