銅綠假單孢菌Ⅲ型分泌系統(tǒng)調(diào)控機(jī)制的研究.pdf

1、本文對(duì)銅綠假單孢菌Ⅲ型分泌系統(tǒng)調(diào)控機(jī)制進(jìn)行了探討。文章研究了TTSS中的popN基因的功能，發(fā)現(xiàn)popN突變子在不同培養(yǎng)基中TTSS的分泌水平存在著顯著差異，影響對(duì)popN基因的功能的判斷。分析了造成表型差異的可能因素，確定蛋白酶對(duì)TTSS分泌蛋白的降解作用，是表型差異存在的主要原因，從而首次系統(tǒng)地闡明popN突變子在不同培養(yǎng)基中，都具有TTSS組成型表達(dá)的表型，對(duì)于深入研究TTSS的調(diào)控機(jī)制具有重要意義。本研究采用轉(zhuǎn)座子mariner

2、，構(gòu)建PAO1菌株的轉(zhuǎn)座子文庫，在特定條件下，篩選TTSS表達(dá)水平增高的菌落。提取突變子的染色體DNA，用限制性內(nèi)切酶消化后，分別克隆到載體上，然后通過測(cè)定序列的方法，分析轉(zhuǎn)座子在染色體上插入的位置。分析51個(gè)深藍(lán)色菌落，其中3個(gè)菌落TTSS的分泌能力明顯高于其它突變子。測(cè)序結(jié)果表明，一個(gè)突變子轉(zhuǎn)座子插入mexT基因的中間，另外一個(gè)插入PA5265基因的C端，位置為1053<'rd>氨基酸，該基因編碼一個(gè)未知功能的蛋白，大小為1089a