從線粒體特征上探討腎虛型骨質(zhì)疏松癥和骨關(guān)節(jié)炎相關(guān)性.pdf

1、目的:
　　將骨質(zhì)疏松癥和骨關(guān)節(jié)炎兩者在線粒體特征上的進(jìn)行臨床對(duì)照研究，通過(guò)基因差異分析來(lái)進(jìn)一步探討骨質(zhì)疏松癥和骨關(guān)節(jié)炎兩者所存在的相關(guān)性。
　　方法:
　　收集2015年3月至2015年12月在廣東省中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院脊柱骨科住院患者共12人的松質(zhì)骨標(biāo)本，均符合診斷標(biāo)準(zhǔn)、納入標(biāo)準(zhǔn)、排除標(biāo)準(zhǔn)的骨質(zhì)疏松癥、骨關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎合并骨質(zhì)疏松癥及正常組者，中醫(yī)辯證為腎虛型。按照進(jìn)入研究順序分為骨質(zhì)疏松癥組(OA組)、骨關(guān)節(jié)炎組(O

2、P)、骨質(zhì)疏松癥合并骨關(guān)節(jié)炎(OA&OP)及正常對(duì)照組(N)。通過(guò)收集各組患者手術(shù)中所取的松質(zhì)骨標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)，采用MeDIP-chip的技術(shù)策略，藉此比較各組線粒體基因表達(dá)譜的差異，并對(duì)差異基因進(jìn)行初步分析。研究過(guò)程中對(duì)所有資料作詳細(xì)記錄并對(duì)其進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
　　結(jié)果:
　　1.各組間年齡差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。經(jīng)過(guò)相關(guān)系數(shù)矩陣分析和DNA片段瓊脂糖凝膠電泳分析，標(biāo)本具有較強(qiáng)的一致性，且DNA片段大小符合后續(xù)試驗(yàn)要求。
　　

3、2.正常對(duì)照組與OA組、OP組及OA&OP組相比，P＜0.05，組間DNA甲基化水平有顯著差異，正常對(duì)照組的DNA甲基化水平明顯高于其他組。與OA&OP組相比較，OA組、OP組的甲基化水平均較OA&OP組高，P＜0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。OA組與OP組的DNA甲基化平均水平相比，P＞0.05，差異無(wú)顯著意義，兩組間的DNA甲基化平均水平相當(dāng)。
　　3.在芯片結(jié)果中，根據(jù)OA組和OP組發(fā)生甲基化的基因進(jìn)行對(duì)比，共篩選1222個(gè)甲基

4、化發(fā)生了高甲基化。進(jìn)行GO和KEGG信號(hào)通路分析，發(fā)現(xiàn)這些差異基因幾乎涉及所有的主要生物學(xué)過(guò)程和信號(hào)通路。
　　4.對(duì)比各組在HCP和ICP上發(fā)生甲基化的基因，與正常對(duì)照組相比，OA組差異基因有644個(gè)，OP組差異基因有669個(gè)，OA&OP組差異基因有492個(gè)。對(duì)于同時(shí)滿足與OA&OP組、正常對(duì)照組有差異基因進(jìn)行比對(duì)分析，發(fā)現(xiàn)OA組和OP組中有4個(gè)共同的差異基因（其中NIF3L1共同存在在HCP和ICP中），具體為:PPIL3、N

5、IF3L1、SMTN、CALHM2。
　　結(jié)論:
　　患有骨質(zhì)疏松癥和/或骨關(guān)節(jié)炎患者基因組甲基化水平低下。骨關(guān)節(jié)炎與骨質(zhì)疏松癥的共同差異體現(xiàn)在某些特定的啟動(dòng)子上，這些基因幾乎涉及到所有生物學(xué)過(guò)程，為進(jìn)一步探索相關(guān)效應(yīng)的分子調(diào)控機(jī)制奠定理論基礎(chǔ)。與OA&OP組、正常對(duì)照組有差異基因進(jìn)行比對(duì)分析而發(fā)現(xiàn)的OA組和OP組中有4個(gè)共同的差異基因(PPIL3、NIF3L1、SMTN、CALHM2)，可能通過(guò)不同的途徑參與到疾病的發(fā)生過(guò)