LiCl對不同基因型小鼠前脂肪細胞成脂分化中Chemerin表達的影響.pdf

1、目前，越來越多的人患有肥胖癥，其可引發(fā)多種并發(fā)癥，如冠心病、動脈粥樣硬化、糖尿病、高血壓、高血脂及腫瘤等疾病，嚴重威脅著人類健康。因此，研究肥胖的發(fā)生機制和防治措施已成為21世紀生命科學和醫(yī)學研究的迫切任務。
　　白色脂肪組織的過度積累引發(fā)肥胖，而脂肪細胞的分化在肥胖發(fā)生過程中扮演了重要角色，涉及復雜的網絡分子調控。Wnt/β-catenin信號通路、chemerin/CMKLR1信號通路及TNF-α均參與脂肪細胞分化的調控過程。

2、其中，Wnt/β-catenin信號通路通過下調C/EBPs和PPARγ的表達水平，抑制成脂分化。Chemerin作為新近發(fā)現的脂肪因子，通過自分泌和旁分泌的方式調節(jié)脂肪細胞分化。有研究表明，分別抑制chemerin及其受體CMKLR1的表達后，可使脂肪細胞的分化過程明顯受阻；同時，chemerin可降低GSK-3β的磷酸化水平，激活GSK-3β，而后者是影響Wnt/β-catenin信號通路中β-catenin是否降解的關鍵因子。由此

3、推測，Wnt/β-catenin信號通路與chemerin信號分子在調控成脂分化過程中存在串話。然而，其串話機制還未明確，尤其在脂肪細胞分化過程中，激活Wnt/β-catenin信號通路對chemerin的表達有何影響？其影響機制是什么？目前未見研究報道。另外，TNF-α作為一種炎癥因子，也通過多種機制抑制成脂分化，而它與 Wnt/β-catenin及chemerin/CMKLR1信號通路之間的關系還不清楚。
　　本實驗以WT小鼠

4、、TNF-α-/-小鼠、Leprdb/db小鼠及DT小鼠為實驗材料，使用Wnt/β-catenin信號通路的激活劑LiCl，干預四種基因型小鼠前脂肪細胞的分化過程，建立Wnt/β-catenin信號通路激活模型，通過實時熒光定量PCR和免疫印跡技術，檢測成脂分化中chemerin及成脂相關因子的表達變化，并分析TNF-α缺失情況下，對LiCl引起chemerin表達變化的影響。實驗結果如下：
　　1.誘導WT小鼠前脂肪細胞分化，確

5、定成脂分化過程中四個關鍵時期，即未誘導時期（誘導前）、誘導早期（誘導3天后）、誘導中期（誘導7天后）及誘導晚期（誘導14天后）。
　　2.形態(tài)學觀察發(fā)現，20 mM LiCl顯著抑制四種基因型小鼠前脂肪細胞的分化，且抑制效果無明顯差異。另外，TNF-α-/-小鼠脂肪細胞的成脂誘導率最高，約80％，WT小鼠次之，DT小鼠再次之，Leprdb/db小鼠最低，約40%。
　　3.實時熒光定量PCR結果表明，使用LiCl干預四種基因

6、型小鼠前脂肪細胞分化過程中，與非干預組相比，成脂相關因子C/EBPβ、C/EBPα、PPARγ2及adiponectin的基因表達水平均下調，Wnt/β-catenin信號通路關鍵分子β-catenin的基因表達水平上調，而chemerin的基因表達水平于分化早期下調，分化中期和晚期均上調。另外，TNF-α缺失可上調成脂分化早期chemerin基因的表達，并且對LiCl通過正反饋調節(jié)機制引起的chemerin基因表達的上調起促進作用。<

7、br>　　4.免疫印跡結果表明，使用LiCl干預四種基因型小鼠前脂肪細胞分化過程中，與非干預組相比，adiponectin蛋白的表達水平顯著下調，Wnt/β-catenin信號通路關鍵分子β-catenin蛋白的表達水平略上調，而chemerin蛋白的表達水平于分化早期下調，分化中期和晚期均無明顯變化。
　　上述結果表明，在脂肪細胞分化過程中，Wnt/β-catenin信號通路主要在轉錄水平調控chemerin的表達，其調控作用主