不同濃度羅哌卡因?qū)χ靖杉毎L增殖與成脂分化的影響.pdf

1、1目的
　　研究表明在實驗室進行體外培養(yǎng)時，人脂肪干細胞（adipose-derived stem cells,ADSCs）與骨髓間充質(zhì)干細胞（bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs）有類似的生物學特性，即同樣具有強大的自體復制、跨胚層或跨系分化的能力，在長期體外培養(yǎng)過程中仍然保持多向分化的能力，同時遺傳背景穩(wěn)定，移植后排異反應較少等優(yōu)點，并且脂肪干細胞具有取材方便、自體來源即可滿足需要等

2、優(yōu)點，已成為近年來研究的熱點。
　　目前臨床應用中獲取人脂肪干細胞的方法，主要是將脂肪抽吸術后得到的脂肪混合液用Ⅰ型膠原酶消化法進行分離、培養(yǎng)，但在吸脂術腫脹麻醉液使用過程中，麻醉藥及藥物濃度對脂肪細胞及分離培養(yǎng)得到的脂肪干細胞的生物學特性是否存在負面影響，知之甚少，國內(nèi)外也少見相關研究報道。大鼠的脂肪組織來源相對豐富，同時涉及的倫理問題及試驗項目限制均較少，是良好的試驗材料。
　　本試驗在現(xiàn)有基本成熟的人和動物體內(nèi)提取脂肪

3、組織并由此培養(yǎng)脂肪干細胞的操作基礎上，在大鼠身上提取脂肪組織進而培養(yǎng)脂肪干細胞，并探尋不同濃度羅哌卡因?qū)Υ笫笾靖杉毎脑鲋衬芰俺芍挠绊?，對脂肪干細胞獲取過程中麻醉方案的最佳方式提供基礎研究依據(jù)，為臨床上高效能獲取脂肪干細胞，減少細胞損耗，提高脂肪干細胞的利用率，并利用其移植修復皮膚軟組織缺損和在整形外科其他方面的應用提供理論依據(jù)。
　　2材料與方法
　　2.1設計：細胞學體外觀察
　　2.2材料：來源于4周齡大

4、鼠雙側腹股溝脂肪組織
　　2.3試驗方法：脂肪干細胞的分離培養(yǎng)→麻醉腫脹液干預→CCK-8試劑盒檢測脂肪干細胞增殖能力→成脂能力檢測
　　2.4觀察指標
　　①大鼠脂肪干細胞形態(tài)學特征
　?、谥靖杉毎脑鲋衬芰?br>　　③細胞成脂分化率
　　結果
　　原代培養(yǎng)的細胞呈較大的類球形單個核細胞，消化傳代后，細胞生長速度明顯較原代細胞增快，2~3天即可覆蓋約85％以上。CCK-8實驗發(fā)現(xiàn)，25μmol/

5、L、50μmol/L、100μmol/L的羅哌卡因處理脂肪干細胞24h,48h,72h后吸光度值明顯下降，與對照組相比，差異有統(tǒng)計學意義。實驗說明羅哌卡因處理可顯著降低脂肪干細胞的增殖能力，在24h時，濃度越高，抑制干細胞增值能力越強，在48h和72h，濃度高低與抑制作用無明顯差別。
　　對照組脂肪干細胞成脂分化比例為（44.61±4.43）%，25μmol/L羅哌卡因處理組為（46.30±3.25）%，50μmol/L羅哌卡因處

6、理組為（49.46±2.34）%，100μmol/L羅哌卡因處理組為（50.07±5.29）%，實驗說明低濃度羅哌卡因處理后對脂肪干細胞的成脂化能力無明顯影響，高濃度羅哌卡因處理后對脂肪干細胞的成脂化能力存在影響。當濃度上升至一定數(shù)值時，脂肪干細胞成脂化率不隨濃度增加而改變，但仍需進一步試驗證實。
　　結論
　　羅哌卡因處理可顯著降低脂肪干細胞的增殖能力，在24h時，濃度越高，抑制干細胞增值能力越強，在48h和72h，濃度高