單核細(xì)胞趨化因子-1在等長(zhǎng)收縮運(yùn)動(dòng)促進(jìn)缺血心肌側(cè)支動(dòng)脈生成中的作用.pdf

1、目的:探討單核細(xì)胞趨化因子-1(MCP-1)在等長(zhǎng)收縮運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練促進(jìn)缺血心肌側(cè)支動(dòng)脈生成中的作用
　　方法:將造模成功的36只雄性SD大鼠，體重(200±20)g，隨機(jī)分為4組:對(duì)照組(CG)、心肌缺血組(MI)、運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練組(ET)、MCP-1抑制劑組(LG)，每組均有9只大鼠。CG組前2周皮下注射生理鹽水，8周全程生理鹽水灌胃，不進(jìn)行等長(zhǎng)收縮運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練;MI組前2周皮下注射異丙腎上腺素(10mg/kg/d)，造成心肌缺血，8周全程生

2、理鹽水灌胃，不進(jìn)行等長(zhǎng)收縮運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練;ET組前2周皮下注射異丙腎上腺素，8周全程生理鹽水灌胃，進(jìn)行為期8周的等長(zhǎng)收縮運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練;LG組在ET組的基礎(chǔ)上進(jìn)行持續(xù)8周的MCP-1抑制劑來(lái)氟米特灌胃。訓(xùn)練8周結(jié)束后，麻醉大鼠，取左心室心肌，采用微球法測(cè)定缺血區(qū)心肌相對(duì)側(cè)支循環(huán)血流量(RCBF);采用免疫組化法測(cè)定缺血區(qū)心肌小動(dòng)脈密度和單核細(xì)胞數(shù)量;以Western blot和熒光定量PCR法測(cè)定缺血心肌中MCP-1的蛋白及mRNA的表達(dá);Micr

3、o CT法檢測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)束后大鼠心臟血管生成情況。
　　結(jié)果:①相對(duì)側(cè)支血流量:CG組的RCBF(0.285±0.012)顯著低于其余3組(P＜0.001)，ET組的RCBF(0.436±0.012)顯著高于其余3組(P＜0.001)，而LG組的RCBF(0.337±0.015)雖然與CG組有顯著性差異(P＜0.001)，但是與MI組RCBF(0.346±0.016)相比，無(wú)顯著性差異(P＞0.05)，并且LG組的RCBF顯著低于ET

4、組(P＜0.001)。②小動(dòng)脈密度:ET組的小動(dòng)脈密度(35.500±1.049)顯著高于其余3組(P＜0.001)，MI組的小動(dòng)脈密度(25.000±1.414)顯著高于CG組(21.667±1.751)(P=0.042)，而LG組的小動(dòng)脈密度(23.833±2.927)與CG組和MI組相比均無(wú)顯著性差異（與CG組相比:P=1;與MI組相比:P=0.39）。③單核細(xì)胞數(shù)量:ET組單核細(xì)胞的數(shù)量(144.085±10.869)顯著高于其

5、余3組(P＜0.001)，LG組單核細(xì)胞的IOD值(92.767±18.426)與CG組(79.594±12.740)和MI組(104.849±4.973)相比均無(wú)顯著性差異（與CG組相比:P=1;與MI組相比:P=1），而MI組單核細(xì)胞的IOD值顯著高于CG組(P=0.020)。④心肌MCP-1蛋白的表達(dá):CG組的MCP-1蛋白表達(dá)(0.160±0.018)顯著低于MI組(0.241±0.025)(P=0.018)和ET組(0.334

6、±0.062)(P＜0.001)，而與LG組(0.184±0.019)無(wú)顯著性差異(P=1);ET組的MCP-1蛋白表達(dá)顯著高于其余3組(P＜0.001)，而MI組的MCP-1蛋白表達(dá)與LG組相比無(wú)明顯差異(P=0.208)。⑤心肌MCP-lmRNA的表達(dá):CG組的MCP-lmRNA表達(dá)(1.737±0.306)顯著低于其余3組(與MI組相比:P=0.006;與ET組相比:P＜0.001;與LG組相比:P=0.038)，而ET組的MCP

7、-lmRNA表達(dá)(5.717±0.656)則顯著高于其余3組(P＜0.001)，MI組(2.890±0.471)與LG組(2.695±0.627)的MCP-1 mRNA表達(dá)無(wú)顯著性差異(P=1)。⑥Micro CT結(jié)果:MI組相較于CG組，原有冠脈顯影存在部分充盈缺損，但有更多的側(cè)支動(dòng)脈生成;ET組的血管顯影良好，且相較于CG組、MI組和LG組有更多側(cè)支動(dòng)脈生成;LG組的原有冠脈顯影有充盈不完全的表現(xiàn)，且側(cè)支動(dòng)脈形成相較于ET組明顯不足

8、。⑦相關(guān)性分析:心肌MCP-1蛋白表達(dá)與單核細(xì)胞數(shù)、小動(dòng)脈密度、相對(duì)側(cè)支血流量的相關(guān)性分析:MCP-1的蛋白表達(dá)與單核細(xì)胞數(shù)量呈高度正相關(guān)(r=0.8315，p＜0.0001); MCP-1的蛋白表達(dá)與小動(dòng)脈密度呈高度正相關(guān)(r=0.8629，p＜0.0001); MCP-1的蛋白表達(dá)與相對(duì)側(cè)支血流量呈高度正相關(guān)(r=0.8798，p＜0.0001)。
　　結(jié)論:持續(xù)8w的等長(zhǎng)收縮運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練可以增加大鼠缺血心肌中MCP-1的表達(dá)，從